Das menschliche Tumorsuppressorprotein p53 bindet sequenzspezifisch an DNA und induziert nach Aktivierung durch verschiedene Stressbedingungen Gene für die Ausloesung des Zellzyklusarrests oder der Apoptose. Der Funktionsverlust durch Mutation ist ein Schluesselereignis in der Krebsentstehung. p53 und eine N-terminal verkuerztes Fragment wurden rekombinant in E.coli exprimiert. Da p53 dabei zu 80% unloeslich als inclusion bodies produziert wird, wurde ein Renaturierungsprotokoll entwickelt und optimiert. Es erfolgte eine Charakterisierung der gereinigten Proteine bzgl. ihrer Struktur und Stabilitaet. Die Ergebnisse belegen, dass p53 ein komplexes Multidomaenen-Protein mit teilweise unstrukturierten Bereichen und geringer Stabilitaet ist. Vermutlich gehört p53 zur Familie der „lose gefalteten“ oder partiell entfalteten Proteinen, deren integrative Funktion eine hohe Flexibilitaet der Struktur erfordert.     «

Das menschliche Tumorsuppressorprotein p53 bindet sequenzspezifisch an DNA und induziert nach Aktivierung durch verschiedene Stressbedingungen Gene für die Ausloesung des Zellzyklusarrests oder der Apoptose. Der Funktionsverlust durch Mutation ist ein Schluesselereignis in der Krebsentstehung. p53 und eine N-terminal verkuerztes Fragment wurden rekombinant in E.coli exprimiert. Da p53 dabei zu 80% unloeslich als inclusion bodies produziert wird, wurde ein Renaturierungsprotokoll entwickelt und o...     »

The human tumor suppressor protein p53 binds DNA sequence-specifically and induces after activation by various stresses to the cell target genes responsible for cell cycle arrest or apoptosis. The loss of function due to mutations is a key event in the development of cancer. p53 and an N-terminally truncated fragment of p53 were produced as recombinant proteins in E.coli. Because p53 is expressed to 80% as insoluble inclusion bodies, a renaturation process was developed and optimized. The purified proteins were characterized regarding their structure and stability. Our results show that p53 is a complex multi-domain protein with partially unstructured regions and low overall stability. Presumably, p53 is another member of the protein family of “loosly folded” or partially unfolded proteins whose function as signal integrators require a highly flexibel structure.     «

The human tumor suppressor protein p53 binds DNA sequence-specifically and induces after activation by various stresses to the cell target genes responsible for cell cycle arrest or apoptosis. The loss of function due to mutations is a key event in the development of cancer. p53 and an N-terminally truncated fragment of p53 were produced as recombinant proteins in E.coli. Because p53 is expressed to 80% as insoluble inclusion bodies, a renaturation process was developed and optimized. The purifi...     »