Mutationen in der Bcr-Abl Kinase sind eine häufige Ursache für Imatinibresistenz im fortgeschrittenen Stadium der CML oder Ph+ ALL. Die Auswirkung dieser Mutationen auf das onkogene Potential von Bcr-Abl wurde bisher noch nicht genauer analysiert. In dieser Arbeit wurde der Effekt der P-loop Mutation Y253H und der hochgradig resistenzvermittelnden Mutation T315I auf die Kinaseaktiviät und das transformierende Potential von Bcr-Abl untersucht. Immunpräzipitiertes Bcr-AblY253H und Bcr-AblT315I Protein wies eine mit Bcr-Ablwt vergleichbare Kinaseaktivität und Substratphosphorylierung auf. Die transformierende Aktivität der Bcr-Abl Mutanten wurde in einem kompetitiven Repopulationsassay untersucht. Die Ergebnisse zeigten ohne Imatinib keinen Wachstumsvorteil der Bcr-AblT315I/Y253H exprimierenden Zellen verglichen mit Bcr-Ablwt.Die Imatinibbehandlung führte hingegen zu einer deutlichen Selektion der Bcr-AblT315I/Y253H transformierten Zellen.      «

Mutationen in der Bcr-Abl Kinase sind eine häufige Ursache für Imatinibresistenz im fortgeschrittenen Stadium der CML oder Ph+ ALL. Die Auswirkung dieser Mutationen auf das onkogene Potential von Bcr-Abl wurde bisher noch nicht genauer analysiert. In dieser Arbeit wurde der Effekt der P-loop Mutation Y253H und der hochgradig resistenzvermittelnden Mutation T315I auf die Kinaseaktiviät und das transformierende Potential von Bcr-Abl untersucht. Immunpräzipitiertes Bcr-AblY253H und Bcr-AblT315I Pro...     »

Mutations in the Bcr-Abl kinase domain are a frequent cause of imatinib resistance in patients with advanced CML or Ph+ ALL. The impact of these mutations on the overall oncogenic potential of Bcr-Abl is presently unclear. In this study, we analyzed the effects of the Bcr-Abl P-loop mutation Y253H and the highly imatinib resistant T315I mutation on kinase activity and transforming efficiency of Bcr-Abl. Immunoprecipitated Bcr-AblY253H and Bcr-AblT315I proteins displayed similar kinase activities and substrate phosphorylation patterns as Bcr-Abl wildtype. The proliferative capacity of mutant and Bcr-Abl wt was analyzed in primary BM cells in vitro and in a murine transplantation model of CML. The results implicate no growth advantage in the absence of imatinib for cells carrying mutant Bcr-Abl compared to Bcr-Ablwt, whereas imatinib treatment clearly selects for leukemic cells expressing mutant Bcr-Abl.     «

Mutations in the Bcr-Abl kinase domain are a frequent cause of imatinib resistance in patients with advanced CML or Ph+ ALL. The impact of these mutations on the overall oncogenic potential of Bcr-Abl is presently unclear. In this study, we analyzed the effects of the Bcr-Abl P-loop mutation Y253H and the highly imatinib resistant T315I mutation on kinase activity and transforming efficiency of Bcr-Abl. Immunoprecipitated Bcr-AblY253H and Bcr-AblT315I proteins displayed similar kinase activities...     »