By means of cryo-electron tomography, native synaptosomes and synapses, thinned by cryo-fibbing, were observed in the immature and mature state and after pharmacologically induced transmitter release facilitation. Tomography data was analyzed by automated hierarchical segmentation of the network of protein filaments interconnecting synaptic vesicles and by intense statistical evaluation of the overall heterogenous ultrastructure. We found the protein Munc13 to be essential for release facilitation and specific presynaptic phenotypes depending on the activity levels of Munc13 and PKC.
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By means of cryo-electron tomography, native synaptosomes and synapses, thinned by cryo-fibbing, were observed in the immature and mature state and after pharmacologically induced transmitter release facilitation. Tomography data was analyzed by automated hierarchical segmentation of the network of protein filaments interconnecting synaptic vesicles and by intense statistical evaluation of the overall heterogenous ultrastructure. We found the protein Munc13 to be essential for release facilitati...
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Übersetzte Kurzfassung:
Mithilfe der Kryoelektronentomographie wurden native Synaptosomen und Synapsen, behandelt mit FIB, im unreifen, sowie reifen Zustand und nach pharmakologischer Behandlung zur Potenzierung der Transmitterauschüttung beobachtet. In Tomogrammen wurden das Netzwerk aus Proteinfilamenten zwischen synaptischen Vesikeln mit hierarchischer automatisierter Segmentierung untersucht und die heterogene synaptische Ultrastruktur durch statistische Methoden ausgewertet. Wir fanden, dass das Protein Munc13 essenziell für die synaptische Potenzierung ist und zeigten die synaptischen Phänotypen in Abhängigkeit der Aktivitäten von Munc13 und PKC.
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Mithilfe der Kryoelektronentomographie wurden native Synaptosomen und Synapsen, behandelt mit FIB, im unreifen, sowie reifen Zustand und nach pharmakologischer Behandlung zur Potenzierung der Transmitterauschüttung beobachtet. In Tomogrammen wurden das Netzwerk aus Proteinfilamenten zwischen synaptischen Vesikeln mit hierarchischer automatisierter Segmentierung untersucht und die heterogene synaptische Ultrastruktur durch statistische Methoden ausgewertet. Wir fanden, dass das Protein Munc13 ess...
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