Ras-Mutationen gehören zu den frühesten Ereignissen der Tumorgenese bei Pankreas-Karzinomen. Wir untersuchten die Validität des Ras-Nachweises im Blut von Tumorpatienten, auch hinsichtlich eines möglichen Einsatzes zur klinischen Diagnostik. Hohe Fehlerraten der bisher etablierten nested-PCR mit Mismatch-Primern und RFLP-Analyse erforderten eine Modifikation der PCR-Bedingungen. Mit der neuen Methode erreichten wir eine Sensitivität von 1:104 bis 1:105 bei minimierter Fehlerrate. Der Ras-Nachweis gelang bei 4,2 % der Blutproben und 84% der Gewebeschnitte; die Sequenzanalysen zeigten jedoch differierende Ergebnisse hinsichtlich der Punktmutationen. Ein sinnvoller klinischer Einsatz der Methodik wird damit unmöglich und eine kritische Beurteilung der bisher veröffentlichten Nachweisraten nötig.    «

Ras-Mutationen gehören zu den frühesten Ereignissen der Tumorgenese bei Pankreas-Karzinomen. Wir untersuchten die Validität des Ras-Nachweises im Blut von Tumorpatienten, auch hinsichtlich eines möglichen Einsatzes zur klinischen Diagnostik. Hohe Fehlerraten der bisher etablierten nested-PCR mit Mismatch-Primern und RFLP-Analyse erforderten eine Modifikation der PCR-Bedingungen. Mit der neuen Methode erreichten wir eine Sensitivität von 1:104 bis 1:105 bei minimierter Fehlerrate. Der Ras-Nachwei...    »

Ras mutations are one of the earliest events in development of pancreatic cancer. We investigated the validity of the detection of ras-mutation in blood from patients with cancer, even with regard to a possible use in clinical diagnostics. High error rates of the nested-PCR with mismatched primers and RFLP-analysis established so far required a modification of the PCR conditions. We reached a sensitivity of 1:104 up to 1:105 with the new method while minimizing the error rate. The detection of ras mutation succeded in 4,2 % of the blood samples and in 84% of the tissue slices; however the sequence analysis showed different results between the point mutations. Therefore there`s no senseful clinical use of this method and a critical view at the rates of mutation proof published so far seems to be demanded.    «

Ras mutations are one of the earliest events in development of pancreatic cancer. We investigated the validity of the detection of ras-mutation in blood from patients with cancer, even with regard to a possible use in clinical diagnostics. High error rates of the nested-PCR with mismatched primers and RFLP-analysis established so far required a modification of the PCR conditions. We reached a sensitivity of 1:104 up to 1:105 with the new method while minimizing the error rate. The detection of r...    »