Die Fokussierung der Serinproteinase Plasminogenaktivator vom Urokinase-Typ (uPA) auf der Tumorzelloberfläche durch die Interaktion mit ihrem spezifischen Rezeptor (uPAR, CD87) ist ein wichtiger Schritt in der Tumorinvasion und der Metastasierung. Hohe Antigen-Konzentrationen von uPA und seinem Inhibitor PAI-1 in Tumoren korrelieren mit einer schlechten Prognose der Patienten. Um den Einfluß des uPAR im Tumorwachstum und in der Tumorausbreitung zu untersuchen, wurde im Rahmen der vorliegenden Arbeit die humane Ovarialkarzinomzellinie OV-MZ-6#8 stabil mit Expressionsplasmiden transfiziert, welche für den humanen GPI-verankerten uPAR (GPI-uPAR) bzw. für eine verkürzte, lösliche Form des uPAR (suPAR) kodieren. OV-MZ-6#8-Zellinien, welche den löslichen uPAR überexprimieren, zeigten eine bis zu 2500fache Erhöhung des suPAR-Gehaltes im Zellkulturüberstand. OV-MZ-6#8 Zellinien, welche den GPI-verankerten uPAR überexprimieren, wiesen einen bis zu 500fachen Anstieg an GPI-uPAR in Zellextrakten auf. Funktionelle Analysen ergaben, daß beide überexprimierten uPAR-Arten uPA binden können. OV-MZ-6#8-Zellinien, welche GPI-uPAR überexprimieren, wiesen eine erhöhte Fibrinmatrix-Degradationsaktivität und zelloberflächenassoziierte Plasminogen-Aktivierungskapazität auf, während diejenigen Zellinien, welche suPAR überexprimieren, eine reduzierte fibrinolytische Aktivität und eine verminderte Proliferationsrate zeigten. Durch in vivo-Studien wurde das Tumorwachstum mittels intraperitonealer Injektion GPI-uPAR- und suPAR-transfizierter OV-MZ-6#8-Zellinien in Nacktmäusen untersucht. OV-MZ-6#8-Zellinien, welche suPAR in hohem Maße exprimieren, zeigten eine ca. 70%ige Reduktion der Tumormasse. GPI-uPAR-überexprimierende OV-MZ-6#8-Zellinien unterschieden sich im Tumorwachstum nicht signifikant von der vektortransfizierten OV-MZ-6#8-Zellinie und der Wildtypzellinie. Sowohl GPI-uPAR als auch suPAR wurden in erhöhter Konzentration in Tumorextrakten und im Blut der Mäuse detektiert. Die Ergebnisse demonstrieren die Fähigkeit des suPAR, uPA von der Zelloberfläche abzufangen und damit das Ovarialkarzinomwachstum und die Tumorausbreitung in vivo signifikant zu reduzieren.     «

Die Fokussierung der Serinproteinase Plasminogenaktivator vom Urokinase-Typ (uPA) auf der Tumorzelloberfläche durch die Interaktion mit ihrem spezifischen Rezeptor (uPAR, CD87) ist ein wichtiger Schritt in der Tumorinvasion und der Metastasierung. Hohe Antigen-Konzentrationen von uPA und seinem Inhibitor PAI-1 in Tumoren korrelieren mit einer schlechten Prognose der Patienten. Um den Einfluß des uPAR im Tumorwachstum und in der Tumorausbreitung zu untersuchen, wurde im Rahmen der vorliegenden Ar...     »

Focussing of the serine protease urokinase (uPA) to the tumor cell surface via interaction with its receptor (uPAR) is an important step in tumor invasion and metastasis. The human ovarian cancer cell line OV-MZ-6#8 was stably transfected with expression plasmids either encoding cell-associated uPAR (GPI-uPAR) or a soluble form of uPAR (suPAR) lacking its glycan lipid anchor. In vitro, high level synthesis of functionally active suPAR inhibited cell proliferation and led to reduced cell-associated fibrin matrix degradation, whereas fibrinolytic activity was increased in OV-MZ-6#8 cells overexpressing GPI-uPAR. Both OV-MZ-6#8-derived clones were inoculated into the peritoneum of nude mice and tested for tumor growth and spread. High level synthesis of suPAR (without altering the physiological expression levels of GPI-uPAR and uPA in these cells) resulted in a significant reduction of tumor burden (up to 86%), due to the inhibition of binding of tumor-derived, human uPA to tumor cell-associated GPI-uPAR by suPAR in the xenogeneic mouse model. In contrast, overexpression of GPI-uPAR in tumor cells did not affect tumor growth. Our results demonstrate that high levels of suPAR within the ovarian cancer cell vicinity act as a potent scavenger for uPA thereby significantly reducing tumor cell growth and cancer progression in vivo.     «

Focussing of the serine protease urokinase (uPA) to the tumor cell surface via interaction with its receptor (uPAR) is an important step in tumor invasion and metastasis. The human ovarian cancer cell line OV-MZ-6#8 was stably transfected with expression plasmids either encoding cell-associated uPAR (GPI-uPAR) or a soluble form of uPAR (suPAR) lacking its glycan lipid anchor. In vitro, high level synthesis of functionally active suPAR inhibited cell proliferation and led to reduced cell-associat...     »