Ziel der Studie war die Beschreibung der Aufnahme von H-3 Leucin in B-Lymphomzellen und deren Änderung durch Behandlung mit Vincristin. Im Vordergund stand hierbei die Abwägung der Eignung der Aminosäure zur Bewertung der Effektivität einer Tumortherapie mittels PET. Lymphomzellen des Typs Su DHL-4 wurden in RPMI 1640-Medium auf 3, 75 x 10^6 Zellen/ml eingestellt und mit einer 0,02 pg/l Vincristinlösung für vier Stunden behandelt. 24 Stunden nach Therapiebeginn schloß sich eine Inkubation von je 100 ml der Zellsuspension mit 100 ml H-3 Leucin und 100 ml Kulturmedium bei variierender Aminosäurekonzentration über unterschiedliche Zeiträume im Schüttelbad (37°C) an. Eine Abtrennung der Zellfraktion erfolgte durch Zentrifugation auf 2200 rpm und anschließendem dreimaligem Waschen mit eiskaltem PBS. Parallel dazu wurde eine zweifache TCA Fällung mit Zentrifugierung bei 6000 rpm zur Bestimmung des Proteineinbaus durchgeführt. Nach der Lysierung des Pellets mit 0,1 N NaOH + 1% SDS konnte die aufgenommene Aktivität im Flüssig-Szintillationszähler gemessen werden. Die Aufnahme von Leucin verlief sowohl linear mit der Zeit als auch mit der jeweiligen Aminosäurekonzentration im Inkubationsmedium. Der Einbau in Proteine nimmt nur linear mit der Zeit zu, nicht aber mit der jeweiligen Aminosäurekonzentration. Nach Behandlung mit Vincristin konnte eine signifikante Verminderung sowohl der Aufnahme, wie auch des Einbaus von Leucin nachgewiesen werden. Die Aufnahme und der Einbau von Leucin werden durch die Behandlung mit Vincristin signifikant herabgesetzt, wobei keine Änderung des Transpoits der Aminosäuren als ursächlich anzusehen ist.     «

Ziel der Studie war die Beschreibung der Aufnahme von H-3 Leucin in B-Lymphomzellen und deren Änderung durch Behandlung mit Vincristin. Im Vordergund stand hierbei die Abwägung der Eignung der Aminosäure zur Bewertung der Effektivität einer Tumortherapie mittels PET. Lymphomzellen des Typs Su DHL-4 wurden in RPMI 1640-Medium auf 3, 75 x 10^6 Zellen/ml eingestellt und mit einer 0,02 pg/l Vincristinlösung für vier Stunden behandelt. 24 Stunden nach Therapiebeginn schloß sich eine Inkubation von je...     »

The aim of the study was to examine the uptake of H-3 leucine into B-lymphoma cells and measure the effect of treatment with vincristine on the uptake of the aminoacid. Of further interrest was the possible usage of the aminoacid by PET as a predictor for effectiveness of a tumor therapy. Lymphoma cells Typ Su DHL-4 were cultivated in RPMI 1640 media, leveled to a concentration of 3,75 x 10^6 cells/ml and treated with a suspension of vincristine of 0,02 pg/l for four hours. 24 hours after the beginning of the treatment phase, 100 ml of the cell suspension, 100 ml of H-3 leucine and 100 ml of media with alternating concentrations of leucine were incubated at a temperature of 37°C. The cell fraction was first separated by using a biofuge at 2200 rpm and subsequently washed with ice-cold PBS three times. By using TCA twice followed by centrifugation at 6000 rpm the acid solvable fraction was separated leaving the protein fraction behind. After lysis with 0,1 N NaOH + 1% SDS the uptake of leucine was measured using a liquid szintillation counter. Uptake of leucine increased linear refering to time of incubation and concentration of leucine in the media. The acid refractory fraction could not be altered with different concentrations of leucine but increased only refering to the time of incubation. After treatment with vincristine a significant decrease of uptake and acid refractory fraction was measured. The decrease was not due to altered capability of the aminoacid transport system.     «

The aim of the study was to examine the uptake of H-3 leucine into B-lymphoma cells and measure the effect of treatment with vincristine on the uptake of the aminoacid. Of further interrest was the possible usage of the aminoacid by PET as a predictor for effectiveness of a tumor therapy. Lymphoma cells Typ Su DHL-4 were cultivated in RPMI 1640 media, leveled to a concentration of 3,75 x 10^6 cells/ml and treated with a suspension of vincristine of 0,02 pg/l for four hours. 24 hours after the be...     »