DNA-based methodologies have become an integral part of food and feed analysis and are commonly applied in different fields such as the analysis of genetically modified organisms (GMO) and the detection of allergens. The method development performed in this study was focussed on novel strategies meeting different demands of GMO and allergen analysis. The new ligation-dependent probe amplification (LPA) technique and the established real-time PCR technology were used to develop and to validate suitable detection methods. A modular system was designed to target GMO at different levels of specificity: the simultaneous detection of screening elements in combination with construct-specific targets and suitable reference genes provides a profiling-like strategy for GMO analysis. In addition, a flexible LPA system for the event-specific quantification of the transgenic maize lines MON810, Bt11 and Bt176 was developed. The LPA system developed for the identification of allergenic components in food allowed the simultaneous detection of DNA from peanut, cashew, pecan nut, pistachio, hazelnut, sesame seeds, macadamia nut, almond, walnut and brazil nut in a single reaction. The sensitivity of the method was comparable to real-time PCR methods and ELISA approaches. In addition, a novel real-time PCR system for the specific and sensitive detection of DNA from cashew nut was developed.     «

DNA-based methodologies have become an integral part of food and feed analysis and are commonly applied in different fields such as the analysis of genetically modified organisms (GMO) and the detection of allergens. The method development performed in this study was focussed on novel strategies meeting different demands of GMO and allergen analysis. The new ligation-dependent probe amplification (LPA) technique and the established real-time PCR technology were used to develop and to validate su...     »

Molekularbiologische Nachweisverfahren sind ein fester Bestandteil in vielen Bereichen der modernen Lebensmittelanalytik geworden. DNA-basierte Methoden werden zur Überwachung von gentechnisch veränderten Organismen (GVO) und Lebensmittelallergenen routinemäßig eingesetzt. Die Vielzahl der kennzeichnungspflichtigen GVO und allergenen Lebensmittelzutaten stellt hohe Anforderungen an die Nachweistechniken. Die neuartige Technik der ligationsabhängigen Amplifizierung von Hybridisierungssonden (LPA) wurde ebenso wie die etablierte Real-time PCR Technologie angewandt, um geeignete Nachweisverfahren zu entwickeln und zu validieren. Für den Nachweis von GVO auf unterschiedlichen Spezifitätsstufen wurde ein modulares LPA-System entworfen, welches die gleichzeitige Detektion von Screening-Elementen, konstruktspezifischen Targets und geeigneten Referenzgenen in einem Reaktionsansatz ermöglicht. Daneben wurde eine flexibles LPA-System zum eventspezifischen Nachweis und zur Quantifizierung der transgenen Maislinien MON810, Bt11, Bt176 entwickelt. Das zur Identifizierung allergener Bestandteile in Lebensmitteln entwickelte LPA-System erlaubt die gleichzeitige Detektion von DNA aus Erdnuss, Cashewnuss, Pecannuss, Pistazie, Haselnuss, Sesam, Macadamianuss, Mandel, Walnuss und Paranuss. Eine vergleichbare Empfindlichkeit der neuartigen Technik mit Real-time PCR Methoden und ELISA-Verfahren konnte gezeigt werden. Daneben wurde eine spezifische und sensitive Real-time PCR Methode zum Nachweis von Cashew-DNA entwickelt.     «

Molekularbiologische Nachweisverfahren sind ein fester Bestandteil in vielen Bereichen der modernen Lebensmittelanalytik geworden. DNA-basierte Methoden werden zur Überwachung von gentechnisch veränderten Organismen (GVO) und Lebensmittelallergenen routinemäßig eingesetzt. Die Vielzahl der kennzeichnungspflichtigen GVO und allergenen Lebensmittelzutaten stellt hohe Anforderungen an die Nachweistechniken. Die neuartige Technik der ligationsabhängigen Amplifizierung von Hybridisierungssonden (LPA)...     »