Im Rahmen der vorliegenden Arbeit wurden die molekularen Eigenschaften des schnellen konventionellen Kinesins aus N. crassa (NcKin-1) in Einzelmolekülexperimenten untersucht. Die Ergebnisse der Untersuchung belegen erstmals, dass die mechanische Flexibilität des nativen Coiled-Coils im Kinesinnacken die Funktionalität eines Kinesinmotors unter Last unterstützt.
Eine Analyse der Kraft-Geschwindigkeits Relationen des NcKin-1 ergab zwei ratenlimitierende Übergänge im chemomechanischen Zyklus des Motors. Die Rate des langsameren Übergangs ist kraftunabhängig, unter niedrigen Kräften limitierend und konnte mit dem Ablösen des ADPs nach einem Schrittereignis identifiziert werden. Die Rate des schnelleren Übergangs weist dagegen eine ausgeprägte Kraftabhängigkeit auf. Diese Rate konnte in einem Modell der diffusiven Suche des Motormoleküls nach der nächsten Mikrotubulibindungsstelle zugeordnet werden, die damit den entscheidenden Prozess bei der Vorwärtsbewegung eines Kinesinmotors darstellt.      «

Im Rahmen der vorliegenden Arbeit wurden die molekularen Eigenschaften des schnellen konventionellen Kinesins aus N. crassa (NcKin-1) in Einzelmolekülexperimenten untersucht. Die Ergebnisse der Untersuchung belegen erstmals, dass die mechanische Flexibilität des nativen Coiled-Coils im Kinesinnacken die Funktionalität eines Kinesinmotors unter Last unterstützt.
Eine Analyse der Kraft-Geschwindigkeits Relationen des NcKin-1 ergab zwei ratenlimitierende Übergänge im chemomechanischen Zyklus des...     »

The single-molecule properties of the conventional kinesin from N. crassa (NcKin-1) were investigated with optical tweezers. The results from these experiments indicate the compliance of kinesin's neck is important to sustain motility under load and reveal a so far unknown constraint on the imperfect coiled-coil heptad pattern of kinesin-1.
By analyzing the force-velocity relation, two rate-limiting transitions in the chemo-mechanical cycle of kinesin-1 could be identified. The rate of the slower transition is independent of applied external forces and represents the release of ADP from the leading head upon its binding to the microtubule. The faster rate displays a pronounced force sensitivity and was attributed to the diffusive search of the leading motor head for the next microtubule binding site. These results support models assuming the diffusive search of the leading head for the next binding site is the fundamental process leading to a net displacement of a kinesin-1 molecule.      «

The single-molecule properties of the conventional kinesin from N. crassa (NcKin-1) were investigated with optical tweezers. The results from these experiments indicate the compliance of kinesin's neck is important to sustain motility under load and reveal a so far unknown constraint on the imperfect coiled-coil heptad pattern of kinesin-1.
By analyzing the force-velocity relation, two rate-limiting transitions in the chemo-mechanical cycle of kinesin-1 could be identified. The rate of the slow...     »