Development and applications of a phase contrast method for cryo-electron microscopy
Translated title:
Entwicklung und Anwendungen einer Phasenkontrastmethode für die Kryoelektronenmikroskopie
Author:
Khoshouei, Maryam
Year:
2018
Document type:
Dissertation
Faculty/School:
Fakultät für Physik
Advisor:
Baumeister, Wolfgang (Prof. Dr.)
Referee:
Baumeister, Wolfgang (Prof. Dr.); Zacharias, Martin (Prof. Dr.)
Language:
de
Subject group:
PHY Physik
TUM classification:
PHY 820d
Abstract:
Application of phase plate technology for transmission electron microscopy has been proposed for more than 80 years. However, it wasn’t until recently that this goal was realized at MPI of Biochemistry with the so-called Volta Phase Plate (VPP). Present thesis demonstrates application of the VPP. This entails achieving smallest protein structure solved to date as well as other biologically novel structures such as several active GPCR complexes. Furthermore, VPP was also applied to cryo-electron tomography and subtomogram averaging. In summary, advantages of the VPP for three-dimensional cryo-EM are discussed.
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Application of phase plate technology for transmission electron microscopy has been proposed for more than 80 years. However, it wasn’t until recently that this goal was realized at MPI of Biochemistry with the so-called Volta Phase Plate (VPP). Present thesis demonstrates application of the VPP. This entails achieving smallest protein structure solved to date as well as other biologically novel structures such as several active GPCR complexes. Furthermore, VPP was also applied to cryo-electron...
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Translated abstract:
Das Potenzial der Phasenplatte für Transmissionselektronenmikroskopie wird seit mehr als 80 Jahren erforscht. Am MPI für Biochemie wurde kürzlich eine neue Generation von Dünnfilm-Phasenplatten entwickelt, die Volta Phasenplatte (VPP). Die vorliegende Dissertation demonstriert den Einsatz und Erfolg der VPP. So gelang unter anderem die Bestimmung der zurzeit kleinsten Proteinstruktur und mehrer aktiven GPCR Komplexe. Darueber hinaus fand die VPP ihre Anwendung auch in Kryo-Elektronentomografie und im sogenannten „Subtomogram averaging“. Diese Dissertation stellt die Vorteile dar, die VPP in den beiden Hauptbereichen der dreidimensionalen Strukturbestimmung durch Kryo-EM bietet.
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Das Potenzial der Phasenplatte für Transmissionselektronenmikroskopie wird seit mehr als 80 Jahren erforscht. Am MPI für Biochemie wurde kürzlich eine neue Generation von Dünnfilm-Phasenplatten entwickelt, die Volta Phasenplatte (VPP). Die vorliegende Dissertation demonstriert den Einsatz und Erfolg der VPP. So gelang unter anderem die Bestimmung der zurzeit kleinsten Proteinstruktur und mehrer aktiven GPCR Komplexe. Darueber hinaus fand die VPP ihre Anwendung auch in Kryo-Elektronentomografie u...
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