Etablierung sensitiver molekularbiologischer Nachweismethoden zur Charakterisierung zirkulierender Tumorzellen beim Mammakarzinom
Translated title:
Development of a sensitive molecular detection method to enable characterization of circulating tumor cells in breast cancer
Author:
Lüdtke, Sabine
Year:
2019
Document type:
Dissertation
Faculty/School:
Fakultät für Medizin
Advisor:
Magdolen, Viktor (Prof. Dr.)
Referee:
Magdolen, Viktor (Prof. Dr.); Weichert, Wilko (Prof. Dr.)
Language:
de
Subject group:
MED Medizin
Abstract:
Aufgrund der geringen Anzahl an zirkulierenden Tumorzellen im Blut von Brustkrebspatienten sind zur deren Charakterisierung sensitive molekularbiologische Nachweismethoden erforderlich. Mittels real-time PCR konnte die Genexpression von ER, HER2 und PTPRC in verschiedenen Zelllinien bis in einen niedrigen Zellzahlbereich von 10-50 Zellen mit einer Sensitivität von >70% bestimmt werden. Weiterhin konnte durch Präamplifikation der cDNA die Detektionssensitivität der real-time PCR erhöht werden. Mit der nun etablierten Methodik können weitere Charakterisierungen von zirkulierenden Tumorzellen erfolgen sowie Genexpressionsanalysen für weitere Marker durchgeführt werden.
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Aufgrund der geringen Anzahl an zirkulierenden Tumorzellen im Blut von Brustkrebspatienten sind zur deren Charakterisierung sensitive molekularbiologische Nachweismethoden erforderlich. Mittels real-time PCR konnte die Genexpression von ER, HER2 und PTPRC in verschiedenen Zelllinien bis in einen niedrigen Zellzahlbereich von 10-50 Zellen mit einer Sensitivität von >70% bestimmt werden. Weiterhin konnte durch Präamplifikation der cDNA die Detektionssensitivität der real-time PCR erhöht werden. Mi...
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Translated abstract:
Since the number of circulating tumor cells in blood of breast cancer patients is low, it is necessary to develop sensitive detection techniques. Using real-time PCR, gene expression of ER, HER2, and PTPRC in different cell lines was demonstrated at a range as low as 10-50 cells with a sensitivity of >70%. Pre-amplification of cDNA further increased detection sensitivity of real-time PCR. This methodology can now be used for characterization of circulating tumor cells as well as to analyze gene expression of other clinically important breast cancer markers.
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Since the number of circulating tumor cells in blood of breast cancer patients is low, it is necessary to develop sensitive detection techniques. Using real-time PCR, gene expression of ER, HER2, and PTPRC in different cell lines was demonstrated at a range as low as 10-50 cells with a sensitivity of >70%. Pre-amplification of cDNA further increased detection sensitivity of real-time PCR. This methodology can now be used for characterization of circulating tumor cells as well as to analyze gene...
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