CRISPlace, an innovative CRISPR/Cas9-based method, was used to efficiently insert transgenes into porcine somatic cells. Using CRISPlace, the AsCas12a gene was successfully integrated into the safe harbor locus ROSA26. The newly developed AsCas12a-expressing pig line showed lower gene editing efficiency compared to Cas9. Additionally, the lncRNA MEG3 was manipulated in porcine cells. Knockout of MEG3 led to a downregulation of the pro-fibrotic signaling TGF-beta pathway.
Übersetzte Kurzfassung:
CRISPlace, eine innovative CRISPR/Cas9-Methode, diente der effizienten Einfügung von Transgenen in somatische Schweinezellen. Mit CRISPlace wurde das AsCas12a-Gen erfolgreich in den ROSA26-Safe-Harbor-Lokus integriert. Die neu geschaffene AsCas12a-exprimierende Schweinelinie zeigte eine niedrigere Geneditierungseffizienz als Cas9. Zusätzlich wurde die lncRNA MEG3 in Schweinezellen manipuliert. Ein Knockout von MEG3 führte zur Herunterregulierung des pro-fibrotischen TGF-Beta-Signalwegs.