In this thesis, the Amber suppression method was established in Bacillus subtilis for the first time. Using this method, a non-natural amino acid with novel chemical functionalities can be site-specifically incorporated into a target protein. By combining the amber suppression system with the efficient protein secretion in B. subtilis an antibody fragment containing norbornene-lysine was recombinantly produced. Following the biorthogonal chemical labelling with a fluorescent dye its function and activity could be verified in an ELISA.
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In this thesis, the Amber suppression method was established in Bacillus subtilis for the first time. Using this method, a non-natural amino acid with novel chemical functionalities can be site-specifically incorporated into a target protein. By combining the amber suppression system with the efficient protein secretion in B. subtilis an antibody fragment containing norbornene-lysine was recombinantly produced. Following the biorthogonal chemical labelling with a fluorescent dye its function and...
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Übersetzte Kurzfassung:
Im Rahmen dieser Dissertation wurde die Amber Suppressionsmethode zum ersten Mal in Bacillus subtilis etabliert. Mittels dieser Methode können unnatürliche Aminosäuren mit neuen chemischen Funktionalitäten, positionsspezifisch in einem Zielprotein eingebaut werden. Dies wurde hier mit der effizienten Proteinsekretion in B. subtilis kombiniert um ein Antikörperfragment mit eingebautem Norbornen-Lysin, rekombinant herzustellen. Folgend der bioorthogonalen chemischen Modifizierung mit einem Fluoreszenzfarbstoff konnten Funktion und Aktivität mittels ELISA gezeigt werden.
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Im Rahmen dieser Dissertation wurde die Amber Suppressionsmethode zum ersten Mal in Bacillus subtilis etabliert. Mittels dieser Methode können unnatürliche Aminosäuren mit neuen chemischen Funktionalitäten, positionsspezifisch in einem Zielprotein eingebaut werden. Dies wurde hier mit der effizienten Proteinsekretion in B. subtilis kombiniert um ein Antikörperfragment mit eingebautem Norbornen-Lysin, rekombinant herzustellen. Folgend der bioorthogonalen chemischen Modifizierung mit einem Fluore...
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