Genetic code expansion (GCE) enables the site-specific incorporation of unnatural amino acids (uAAs) into proteins in living cells. This is typically achieved by using an engineered orthogonal aminoacyl-tRNA synthetase (aaRS)/tRNA pair that directs the incorporation of the uAA according to an amber codon introduced into a gene of interest. Within this thesis I have developed and optimized GCE-tools (including novel uAAs and aaRS/tRNA pairs) to study and validate protein-protein interactions.
Übersetzte Kurzfassung:
Die Erweiterung des genetischen Codes (GCE) ermöglicht den ortsspezifischen Einbau von unnatürlichen Aminosäuren (uAAs) in Proteine in lebenden Zellen. Dies wird durch die Verwendung eines orthogonalen Aminoacyl-tRNA-Synthetase (aaRS)/tRNA Paares ermöglicht, das den Einbau der uAA entsprechend eines Amber Codon, das in ein Gen eingeführt wird, steuert. Im Rahmen dieser Arbeit wurden neue Werkzeuge zur genetischen Code Erweiterung (einschließlich neuer uAAs und aaRS/tRNA-Paare) entwickelt und optimiert, die der Untersuchung und Validierung von Protein-Protein-Interaktionen dienen.
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Die Erweiterung des genetischen Codes (GCE) ermöglicht den ortsspezifischen Einbau von unnatürlichen Aminosäuren (uAAs) in Proteine in lebenden Zellen. Dies wird durch die Verwendung eines orthogonalen Aminoacyl-tRNA-Synthetase (aaRS)/tRNA Paares ermöglicht, das den Einbau der uAA entsprechend eines Amber Codon, das in ein Gen eingeführt wird, steuert. Im Rahmen dieser Arbeit wurden neue Werkzeuge zur genetischen Code Erweiterung (einschließlich neuer uAAs und aaRS/tRNA-Paare) entwickelt und opt...
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