Die NO/cGMP/cGKI-Signalkaskade spielt u.a. bei der Regulation des glatten Muskeltonus und der Thrombozytenaktivität eine wichtige Rolle. IRAG, ein Substratprotein der cGMP-abhängigen Proteinkinase I (cGKI), wird vor allem in glatten Muskelzellen und Thrombozyten stark exprimiert. In dieser Arbeit wurde die intrazelluläre Lokalisation von IRAG analysiert. Dabei konnte die C-terminale Domäne TMc als funktionelle Transmembrandomäne identifiziert werden, über welche dieses Protein im endoplasmatischen Retikulum verankert wird. Außerdem konnten mittels Massenspektrometrie zwei in vivo Phosphorylierungsstellen von IRAG in humanen Thrombozyten ermittelt werden. Die Untersuchungen mit zwei unterschiedlichen phosphospezifischen Antikörpern ergaben, dass beide Aminosäuren cGMP-abhängig in vivo phosphoryliert werden. Damit stellt IRAG ein in vivo Substrat der cGKI in Thrombozyten dar, und könnte möglicherweise bei der durch die cGKI-vermittelten Hemmung der Thrombozytenfunktion beteiligt sein.     «

Die NO/cGMP/cGKI-Signalkaskade spielt u.a. bei der Regulation des glatten Muskeltonus und der Thrombozytenaktivität eine wichtige Rolle. IRAG, ein Substratprotein der cGMP-abhängigen Proteinkinase I (cGKI), wird vor allem in glatten Muskelzellen und Thrombozyten stark exprimiert. In dieser Arbeit wurde die intrazelluläre Lokalisation von IRAG analysiert. Dabei konnte die C-terminale Domäne TMc als funktionelle Transmembrandomäne identifiziert werden, über welche dieses Protein im endoplasmatisch...     »

NO/cGMP/cGKI signaling plays an important role in many physiological processes, e.g. regulation of smooth muscle tone and platelet function. IRAG, a cGMP-dependent protein kinase I (cGKI) substrate, is highly expressed in smooth muscle cells and platelets. In this project, the intracellular localisation of IRAG was analysed. Thereby, the carboxyterminal domain TMc was identified as functional transmembrane domain, which anchors IRAG in intracellular membranes of the endoplasmic reticulum. Additionally, two in vivo phosphorylation sites of IRAG in human platelets were detected by mass spectrometry. Investigation with two different phosphospecific antibodies revealed that both sites are cGMP-dependently phosphorylated in vivo. Therefore, IRAG represents an in vivo substrate of cGKI in platelets and possibly this protein could be involved in cGKI mediated inhibition of platelet function.     «

NO/cGMP/cGKI signaling plays an important role in many physiological processes, e.g. regulation of smooth muscle tone and platelet function. IRAG, a cGMP-dependent protein kinase I (cGKI) substrate, is highly expressed in smooth muscle cells and platelets. In this project, the intracellular localisation of IRAG was analysed. Thereby, the carboxyterminal domain TMc was identified as functional transmembrane domain, which anchors IRAG in intracellular membranes of the endoplasmic reticulum. Additi...     »