In this thesis it is demonstrated that furin is required for constitutive processing of RPTPk within the secretory pathway. We next showed that k is specifically targeted by two additional cleavages that we named S2 and S3 to specify the result of processing at sites 2 and 3, sites downstream of S1. Processing at S2 is mediated by metalloproteases and results in RPTPk shedding. It was found to be promoted by cell density and phenothiazine exposure and k’s extracellular subunit was required for shedding induced by both stimuli. Moreover, conditions that blocked the functionality of caveolae-dependent receptor internalisation into endocytic compartments diminished S2 cleavage, indicating that it proceeds in the course of internalisation via caveolae. In addition, Presenilin 1 was shown to further cleave P2, the product of S2 processing, thereby generating the cytoplasmic k isoform P3, accumulation of which is diminished by more than 90% in 10 out of 25 primary human kidney tumors. Plasminogen was identified as RPTPkMAM domain binding protein. Binding studies performed with kMAM derived peptide libraries demonstrated that Plasminogen targets the palindromic sequence DFSYLLYSQK and substitutional analysis revealed that the residues D, Y, Y and K are involved in binding. Similar motifes were identified in proteins derived from pathogenic bacteria.     «

In this thesis it is demonstrated that furin is required for constitutive processing of RPTPk within the secretory pathway. We next showed that k is specifically targeted by two additional cleavages that we named S2 and S3 to specify the result of processing at sites 2 and 3, sites downstream of S1. Processing at S2 is mediated by metalloproteases and results in RPTPk shedding. It was found to be promoted by cell density and phenothiazine exposure and k’s extracellular subunit was required for s...     »

In der vorliegenden Arbeit wurde gezeigt, dass die konstitutive proteolytische Prozessierung der RPTPk durch die Protein Convertase Furin erfolgt. Es wurden weitere, spezifische Prozessierungen der RPTPk identifiziert, die als S2- und S3- Spaltungen bezeichnet wurden. Die S2-Prozessierung erfolgt durch Metalloproteasen und resultiert in der Freisetzung des extrazellulären Fragments in das Zellmedium. Als Stimuli dieser Prozessierung konnten hohe Zelldichten und Phenothiazine identifiziert werden. Für die Induktion der S2-Spaltung durch beide Stimuli ist das Vorhandensein des RPTPk extrazellulären Fragments notwendig. Ein zweiter, notwendinger Faktor ist die Funktionalität von Endozytose-Prozessen die von Caveolae (Cholesterol-reiche Membranareale) abhängig sind. Das S2-Spaltprodukt P2 wird durch Presenilin-1 weiter prozessiert (S3), was schliesslich zur Freisetzung der cytoplasmatischen k-Isoform P3 führt, deren Akkumulierung in 10 von 25 primären, humanen Nierentumoren um mehr als 90% verringert ist. Plasminogen wurde als ein mit der MAM-Domäne der RPTPk interagierendes Protein identifiziert. Plasminogen bindet an die palindromische Sequenz DFSYLLYSQK und die Aminosäurereste D, Y, Y und K sind direkt in die Interaktion involviert. Ähnliche Sequenzmotive konnten in Proteinen von pathogenen Bakterien identifiziert werden.     «

In der vorliegenden Arbeit wurde gezeigt, dass die konstitutive proteolytische Prozessierung der RPTPk durch die Protein Convertase Furin erfolgt. Es wurden weitere, spezifische Prozessierungen der RPTPk identifiziert, die als S2- und S3- Spaltungen bezeichnet wurden. Die S2-Prozessierung erfolgt durch Metalloproteasen und resultiert in der Freisetzung des extrazellulären Fragments in das Zellmedium. Als Stimuli dieser Prozessierung konnten hohe Zelldichten und Phenothiazine identifiziert werden...     »