Tryptasen sind tetramere Trypsin-ähnliche Serinproteasen die aus den sekretorischen Granula von Mastzellen freigesetzt werden. Sie scheinen an der Pathogenese von chronisch entzündlichen Erkrankungen wie Asthma beteiligt zu sein. Zur Untersuchung von physiologisch relevanten Unterschieden der Tryptase Isoenzyme alpha 1, beta 1a, beta 1b, beta 2 und beta 3 wurden sie in Pichia Pastoris exprimiert. Die biochemische und funktionelle Charakterisierung zeigte trotz einer über 95%-igen Sequenzidentität dieser Isoenzyme Unterschiede hinsichtlich Glycosylierung, Aktivität, Stabilität und Hemmbarkeit. Röntgenstrukturanalysen einzelner Isoenzyme wie auch von Komplexen von Tryptasen mit Inhibitoren zeigten strukturelle Ursachen dieser Unterschiede, außerdem dienten sie als Grundlagen zum verbesserten Design solcher Inhibitoren.     «

Tryptasen sind tetramere Trypsin-ähnliche Serinproteasen die aus den sekretorischen Granula von Mastzellen freigesetzt werden. Sie scheinen an der Pathogenese von chronisch entzündlichen Erkrankungen wie Asthma beteiligt zu sein. Zur Untersuchung von physiologisch relevanten Unterschieden der Tryptase Isoenzyme alpha 1, beta 1a, beta 1b, beta 2 und beta 3 wurden sie in Pichia Pastoris exprimiert. Die biochemische und funktionelle Charakterisierung zeigte trotz einer über 95%-igen Sequenzidentitä...     »

Mast cell tryptases comprise a family of trypsin-like serine proteinases that have been implicated in the pathogenesis of chronic inflammatory disorders, most notably asthma. To allow the characterization of individual family members the tryptases alpha 1, beta 1a, beta 1b, beta 2 and beta 3 were cloned, expressed in Pichia pastoris, and purified. Although these tryptases are >90% identical in amino acid sequence, they differ in glycosylation, enzymatic activity, stability and affinity towards dibasic inhibitors. Crystallographic analysis of the isoenzymes and their complexes with inhibitors revealed that all tryptases form virtually identical tetramers but that the active site of the alpha 1 isoenzyme is distorted, explaining its low activity. These structures now provide a basis for the rational optimisation of highly active and selective tryptase inhibitors.     «

Mast cell tryptases comprise a family of trypsin-like serine proteinases that have been implicated in the pathogenesis of chronic inflammatory disorders, most notably asthma. To allow the characterization of individual family members the tryptases alpha 1, beta 1a, beta 1b, beta 2 and beta 3 were cloned, expressed in Pichia pastoris, and purified. Although these tryptases are >90% identical in amino acid sequence, they differ in glycosylation, enzymatic activity, stability and affinity towards d...     »