Ziel dieser Arbeit war die Entwicklung einer Methode zur N-terminalen, regiospezifischen Modifikation von Peptiden und Proteinen unter Verwendung der reversen Proteolyse. Mit Hilfe der IgA-Protease wurden die Bedingungen für die Segmentkupplung auf einem Modellpeptid (Carbohydrate Structure Mimicking Peptide) optimiert, um auf die Proteine übertragen zu werden. An das N-Terminus von zwei Rekombinantproteinen ( über site-directed-mutagenesis modifizierte Anticalin FluA: IgAP1 und IgAP2) wurde erfolgreich ein Tetrapeptid (PRPP) mit einer unnatürlichen Schutzgruppe (Boc) angeknüpft. Die Struktur von modifizierten Proteinen wurde mit MALDI-TOF-MS und Edman Abbau bestätigt. Die neue Proteinmodifikationsmethode ermöglicht selektive (regio-, chemo- und stereoselektive), milde und vielseitige in vitro Derivatisierung nativer Proteine und eröffnet damit neue Applikationsbereiche in Analytik, Separation, Reinigung, Immobilisierung und Quantifizierung von Proteinen, sowie in enzyme-engineering, klinischen und diagnostischen Studien, Herstellung von Proteinfusionen, Proteinsemisynthese und Peptidsegmentkupplung.     «

Ziel dieser Arbeit war die Entwicklung einer Methode zur N-terminalen, regiospezifischen Modifikation von Peptiden und Proteinen unter Verwendung der reversen Proteolyse. Mit Hilfe der IgA-Protease wurden die Bedingungen für die Segmentkupplung auf einem Modellpeptid (Carbohydrate Structure Mimicking Peptide) optimiert, um auf die Proteine übertragen zu werden. An das N-Terminus von zwei Rekombinantproteinen ( über site-directed-mutagenesis modifizierte Anticalin FluA: IgAP1 und IgAP2) wurde erf...     »

The aim of this work was the development of a method for N-terminal, regiospecific peptide and protein modification using the reverse proteolysis reaction. The conditions for the segment coupling were optimized on a model peptide (Carbohydrate Structure Mimicking Peptide) with IgA protease and than applied to proteins. On the N-terminus of two recombinant proteins (with site directed mutagenesis modified anticalin FluA: IgAP1 and IgAP2) a tetra peptide (PRPP) with an artificial protecting group (Boc) was successfully connected. The structures of the modified proteins were determined with MALDI-TOF-MS and Edman Degradation. This new method for protein modification enables selective (regio-, chemo- and stereo selective), mild and very varied in vitro derivatization of native proteins and opens new application fields, e.g. analysis, separation, cleaning, immobilization, quantification of proteins, protein engineering, clinical studies, production of protein fusions, protein semi synthesis and peptide segment coupling.     «

The aim of this work was the development of a method for N-terminal, regiospecific peptide and protein modification using the reverse proteolysis reaction. The conditions for the segment coupling were optimized on a model peptide (Carbohydrate Structure Mimicking Peptide) with IgA protease and than applied to proteins. On the N-terminus of two recombinant proteins (with site directed mutagenesis modified anticalin FluA: IgAP1 and IgAP2) a tetra peptide (PRPP) with an artificial protecting group...     »