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- Original title:
- Engineering conditional Cas12a guide RNAs
- Translated title:
- Die Entwicklung schaltbarer Cas12a Guide RNAs
- Author:
- Oesinghaus, Lukas
- Year:
- 2022
- Document type:
- Dissertation
- Faculty/School:
- Fakultät für Physik
- Advisor:
- Simmel, Friedrich C. (Prof. Dr.)
- Referee:
- Simmel, Friedrich C. (Prof. Dr.); Jungmann, Ralf (Prof. Dr.)
- Language:
- en
- Subject group:
- PHY Physik
- Keywords:
- CRISPR, toehold-mediated strand displacement, synthetic biology
- Translated keywords:
- CRISPR, toehold-mediated strand displacement, Synthetische Biologie
- TUM classification:
- PHY 820; CIT 900
- Abstract:
- Spatiotemporal control of the activity of CRISPR proteins is of general interest for basic research and therapeutics. We establish such control by modification of Cas12a guide RNAs. We primarily use activation by toehold-mediated strand displacement, which we use to switch Cas12a activity in vitro, in bacteria, and in mammalian cells. For the latter, we investigate the use of both Pol III and Pol II promoters for the transcription of circuit components.
- Translated abstract:
- Räumliche und zeitliche Kontrolle der Aktivität von CRISPR Proteinen ist sowohl für Grundlagenforschung als auch für Medizin wünschenswert. Wir etablieren eine solche Kontrolle durch Entwicklung schaltbarer Cas12a Guide RNAs. Hierzu nutzen wir primär Aktivierung durch Toehold-Mediated Strand Displacement. Wir demonstrieren Kontrolle von Cas12a Aktivität in vitro, in Bakterien und in Säugetierzellen, wobei wir für Letzteres sowohl die Nutzung von Pol III als auch Pol II Promotoren untersuchen.
- WWW:
- https://mediatum.ub.tum.de/?id=1633432
- Date of submission:
- 19.11.2021
- Oral examination:
- 30.06.2022
- File size:
- 298288540 bytes
- Pages:
- 246
- Urn (citeable URL):
- https://nbn-resolving.de/urn/resolver.pl?urn:nbn:de:bvb:91-diss-20220630-1633432-1-9
- Last change:
- 02.08.2022
BibTeX