Transmembrandomänen (TMDn) sind Proteinstrukturen, welche die Lipiddoppelschicht durchspannen. Auf dem ToxR Protein basierende Systeme werden häufig verwendet, um homotypische Interaktionen von TMDn zu untersuchen. Das Prinzip dieser Methode ist, dass die Selbstinteraktion von jeglichen TMDn, welche als ToxR Fusionsprotein vorliegen, zu einer Oligomerisierung des ToxR Proteins in der inneren Bakterienmembran führt und somit die Transkription eines Reportergens aktiviert. In dieser Arbeit wurden unterschiedliche Promotoren verwendet, welche eine vereinfachte Detektion von TMD-TMD Interaktionen ermöglichen. Diese Stämme stellen somit eine Erweiterung des ToxR Systems dar, da sie zur Selektion von nicht, schwach, mittelstark bzw. stark interagierenden TMDn aus kombinatorischen Bibliotheken verwendet werden können. Des Weiteren konnte durch den Einsatz einer ToxR Mutante (ToxR*) ein neuartiges Kompetitorsystem aufgebaut werden, welches die Detektion heterolog interagierender TMDn zulässt.     «

Transmembrandomänen (TMDn) sind Proteinstrukturen, welche die Lipiddoppelschicht durchspannen. Auf dem ToxR Protein basierende Systeme werden häufig verwendet, um homotypische Interaktionen von TMDn zu untersuchen. Das Prinzip dieser Methode ist, dass die Selbstinteraktion von jeglichen TMDn, welche als ToxR Fusionsprotein vorliegen, zu einer Oligomerisierung des ToxR Proteins in der inneren Bakterienmembran führt und somit die Transkription eines Reportergens aktiviert. In dieser Arbeit wurden...     »

Assay systems based on the ToxR protein are widely used to investigate interaction of transmembrane domains that come from natural proteins or are isolated from combinatorial libraries. The principle of this method is that self-interaction of any given transmembrane domain, which is expressed within a ToxR chimeric protein, drives ToxR-ToxR assembly in a bacterial inner membrane and transcription activation of downstream reporter genes in appropriate constructed bacterial strains. This work describes the application of other known ToxR-regulated promoters. Self interaction of transmembrane domains induces or represses reporter enzyme expression in this new ToxR-based system. In addition, a new method was developed to investigate heterotypic TMD-TMD interaction. In this system, a homotypically interacting transmembrane domain within the ToxR protein is co-expressed with a potential competitor that is embedded within an inactivated ToxR mutant (ToxR*).     «

Assay systems based on the ToxR protein are widely used to investigate interaction of transmembrane domains that come from natural proteins or are isolated from combinatorial libraries. The principle of this method is that self-interaction of any given transmembrane domain, which is expressed within a ToxR chimeric protein, drives ToxR-ToxR assembly in a bacterial inner membrane and transcription activation of downstream reporter genes in appropriate constructed bacterial strains. This work desc...     »