Semi-rationales Design der Saccharose-Isomerase SmuA und der Alkoholdehydrogenase EhADH1 für Anwendungen in der industriellen Biotechnologie
Translated title:
Semi-rational design of the sucrose isomerase SmuA and the alcohol dehydrogenase EhADH1 for applications in industrial biotechnology
Author:
Pilak, Patrick
Year:
2021
Document type:
Dissertation
Faculty/School:
TUM School of Life Sciences
Advisor:
Skerra, Arne (Prof. Dr.)
Referee:
Skerra, Arne (Prof. Dr.); Liebl, Wolfgang (Prof. Dr.)
Language:
de
Subject group:
NAT Naturwissenschaften (allgemein)
TUM classification:
CHE 800
Abstract:
Untersuchungsgegenstand der Arbeit war die Optimierung zweier funktionell unterschiedlicher bakterieller Enzyme durch semi-rationales Protein-Engineering: eine Saccharose-Isomerase zum Zweck der Isomerisierung von Saccharose zu Isomaltulose und einer Alkoholdehydrogenase zur Anwendung bei der Biosynthese von L-Lysin aus dem Erdölbegleitgas Ethan mit einem Gesamtzellkatalysator. Die Enzyme wurden in Escherichia coli produziert, biochemisch charakterisiert und ihre katalytische Aktivität analysiert. Durch iterative Mutagenese konnten die Produktspezifitäten beider Enzyme signifikant verbessert werden.
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Untersuchungsgegenstand der Arbeit war die Optimierung zweier funktionell unterschiedlicher bakterieller Enzyme durch semi-rationales Protein-Engineering: eine Saccharose-Isomerase zum Zweck der Isomerisierung von Saccharose zu Isomaltulose und einer Alkoholdehydrogenase zur Anwendung bei der Biosynthese von L-Lysin aus dem Erdölbegleitgas Ethan mit einem Gesamtzellkatalysator. Die Enzyme wurden in Escherichia coli produziert, biochemisch charakterisiert und ihre katalytische Aktivität analysier...
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Translated abstract:
Subject of the study was the optimization of two functionally different bacterial enzymes via semi-rational protein engineering: a sucrose isomerase for the isomerization of sucrose to isomaltulose and an alcohol dehydrogenase to be applied for the biosynthesis of L-lysine from the petroleum gas ethane by a whole cell catalyst. The enzymes were produced in Escherichia coli and their biochemical and catalytic properties were characterized. Using iterative mutagenesis, the product specificity of both enzymes was significantly improved.
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Subject of the study was the optimization of two functionally different bacterial enzymes via semi-rational protein engineering: a sucrose isomerase for the isomerization of sucrose to isomaltulose and an alcohol dehydrogenase to be applied for the biosynthesis of L-lysine from the petroleum gas ethane by a whole cell catalyst. The enzymes were produced in Escherichia coli and their biochemical and catalytic properties were characterized. Using iterative mutagenesis, the product specificity of b...
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