Generation and functional characterization of CRISPR/Cas9-expressing chickens to protect them from Marek´s disease virus
Translated title:
Generierung und funktionelle Charakterisierung von CRISPR/Cas9-exprimierenden Hühnern, um sie vor der Marekschen-Krankheit zu schützen
Author:
Duda, Natalie Denise
Year:
2021
Document type:
Dissertation
Faculty/School:
TUM School of Life Sciences
Advisor:
Schusser, Benjamin (Prof. Dr.)
Referee:
Schusser, Benjamin (Prof. Dr.); Kaufer, Benedikt B. (Prof., Ph.D.)
Language:
en
Subject group:
NAT Naturwissenschaften (allgemein)
TUM classification:
CHE 880
Abstract:
CRISPR/Cas9 has become a powerful genome editing technology where the challenge lies in the simultaneous delivery of CRISPR/Cas9 components for in vivo applications. This work circumvents this problem by generating the first chicken line with ubiquitous Cas9-expression for efficient Cas9-mediated ex vivo and in vivo gene editing by delivery of guide RNAs. To protect chickens from Marek´s disease virus (MDV), a second chicken line was generated that ubiquitously expresses Cas9 and guide RNAs targeting essential genes of MDV.
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CRISPR/Cas9 has become a powerful genome editing technology where the challenge lies in the simultaneous delivery of CRISPR/Cas9 components for in vivo applications. This work circumvents this problem by generating the first chicken line with ubiquitous Cas9-expression for efficient Cas9-mediated ex vivo and in vivo gene editing by delivery of guide RNAs. To protect chickens from Marek´s disease virus (MDV), a second chicken line was generated that ubiquitously expresses Cas9 and guide RNAs targ...
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Translated abstract:
CRISPR/Cas9 hat sich zu einem der effizientesten und präzisesten Werkzeuge zur Genom-Editierung entwickelt. Die Anwendung in vivo ist jedoch schwierig, weil dafür beide CRISPR/Cas9-Komponenten gleichzeitig in die Zelle eingebracht werden müssen. Diese Arbeit beschreibt die erstmalige Erzeugung einer transgenen Hühnerlinie mit ubiquitärer Cas9-Expression, die als vielseitige Ressource für ex vivo und in vivo Genom-Editierung im Huhn genutzt werden kann. Des Weiteren wurde eine zweite Hühnerlinie mit ubiquitärer Cas9 und Guide-RNA Expression generiert, mit dem Ziel sie vor der Marekschen-Krankheit zu schützen.
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CRISPR/Cas9 hat sich zu einem der effizientesten und präzisesten Werkzeuge zur Genom-Editierung entwickelt. Die Anwendung in vivo ist jedoch schwierig, weil dafür beide CRISPR/Cas9-Komponenten gleichzeitig in die Zelle eingebracht werden müssen. Diese Arbeit beschreibt die erstmalige Erzeugung einer transgenen Hühnerlinie mit ubiquitärer Cas9-Expression, die als vielseitige Ressource für ex vivo und in vivo Genom-Editierung im Huhn genutzt werden kann. Des Weiteren wurde eine zweite Hühnerlinie...
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