Anticalin, protein biochemistry, protein engineering, VEGF receptor 3
TUM classification:
CHE 800d
Abstract:
Mit dem Ziel, Proteinreagenzien für die diagnostische Bildgebung zu entwickeln, wurden durch kombinatorisches Protein-Engineering neuartige Bindeproteine (Anticaline) gegen den tumorassoziierten VEGF-Rezeptor 3 (VEGFR-3) selektiert. VEGFR-3 bindende Anticaline wurden in E. coli produziert, biochemisch charakterisiert und ggf. optimiert. Die drei vielversprechensten Anticaline wiesen unterschiedliche Bindungsmodi mit hohen Affinitäten (pM) auf. Auf der Grundlage des affinsten Anticalins wurden bifunktionelle Proteine konstruiert: ein „ChromoCalin“ für die in vitro Diagnostik und durch PASylierung ein Anticalin für die Radio-Immundiagnostik.
Translated abstract:
To develop protein reagents suitable for diagnostic imaging, novel binding proteins (Anticalins) that specifically recognize the tumor associated VEGF receptor 3 were generated by combinatorial protein engineering. VEGFR-3 binding Anticalins were produced in E. coli, characterized and, if necessary, optimized. The three most promising Anticalins revealed distinct binding modi with high affinities (pM). The Anticalin with highest affinity served as a buiding block for construction of bifunctional proteins: a „CromoCalin“ suitable for in vitro diagnostics and a PASylated Anticalin suitable for radio-immunodiagnostics.