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Original title:
Crystal Contact Engineering to Enhance Protein Crystallization Processes
Translated title:
Austausch von Aminosäuren an Kristallkontakten zur Verbesserung von Proteinkristallisationsprozessen
Author:
Grob, Phillip
Year:
2020
Document type:
Dissertation
Faculty/School:
Fakultät für Maschinenwesen
Advisor:
Weuster-Botz, Dirk (Prof. Dr.)
Referee:
Weuster-Botz, Dirk (Prof. Dr.); Groll, Michael (Prof. Dr.)
Language:
en
Subject group:
BIO Biowissenschaften
Keywords:
Protein crystallization, Crystal contact engineering, Downstream processing, Protein purification, Lactobacillus brevis alcohol dehydrogenase, Biotechnology
Translated keywords:
Proteinkristallisation, Protein-Engineering, Proteinreinigung, Lactobacillus brevis alcohol dehydrogenase, Biotechnologie
TUM classification:
CIT 900d
Abstract:
The crystal contacts of an alcohol dehydrogenase from Lactobacillus brevis, recombinantly available with E. coli, were analyzed to subsequently exchange individual amino acids in a targeted approach. The aim was to enhance crystal contact interactions. Many of the enzyme mutants crystallized faster than the non-modified enzyme. The generation of electrostatic interactions was particularly successful, enabling protein crystallization from cell lysate as an efficient purification method.
Translated abstract:
Die Kristallkontakte einer mit E. coli rekombinant verfügbaren Alkoholdehydrogenase aus Lactobacillus brevis wurden analysiert, um dort nachfolgend einzelne Aminosäuren gezielt zur Erzeugung verstärkter Wechselwirkungen auszutauschen. Viele der Enzymmutanten kristallisierten schneller als das Ausgangsenzym. Besonders erfolgreich war die Erzeugung von elektrostatischen Wechselwirkungen, so dass eine Proteinkristallisation direkt aus Zelllysat zur effizienten Produktaufarbeitung ermöglicht wurde.
WWW:
https://mediatum.ub.tum.de/?id=1545983
Date of submission:
28.05.2020
Oral examination:
20.11.2020
File size:
13909112 bytes
Pages:
160
Urn (citeable URL):
https://nbn-resolving.de/urn/resolver.pl?urn:nbn:de:bvb:91-diss-20201120-1545983-1-8
Last change:
21.01.2021
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