In der vorliegenden Arbeit wurde ein markerfreies Deletionssystem für Gluconobacter oxydans, basierend auf der Gegenselektion mit 5-Fluorouracil, etabliert und durch gezielte Geninaktivierung die Rolle ausgewählter Stoffwechselenzyme analysiert. Bei der Untersuchung des Entner-Doudoroff Weges wurde mittels der upp-basierten markerfreien Deletionsmethode die Gene für die 6-Phosphogluconat-Dehydratase und KDPG Aldolase deletiert. Diese Mutanten waren anschließend nicht mehr in der Lage auf Glukonat zu wachsen. Somit konnte die Notwendigkeit des ED-Weges für den Abbau von Glukonat belegt werden. Im Rahmen dieser Arbeit wurde die Annotation des Genoms von G. oxydans DSM3504 durchgeführt. Beim Vergleich der beiden Stämme G. oxydans DSM3504 und G. oxydans 621H zeigte sich eine hohe Übereinstimmung der identifizierten offenen Leserahmen. Eine Besonderheit von G. oxydans DSM3504 war das Vorhandensein einer weiteren NADH-Dehydrogenase vom TypII. Deren Überexpression in G. oxydans 621H führte zu einer höheren End-OD in Vollmedium und näherte sich somit an die von G. oxydans DSM3504 an.     «

In der vorliegenden Arbeit wurde ein markerfreies Deletionssystem für Gluconobacter oxydans, basierend auf der Gegenselektion mit 5-Fluorouracil, etabliert und durch gezielte Geninaktivierung die Rolle ausgewählter Stoffwechselenzyme analysiert. Bei der Untersuchung des Entner-Doudoroff Weges wurde mittels der upp-basierten markerfreien Deletionsmethode die Gene für die 6-Phosphogluconat-Dehydratase und KDPG Aldolase deletiert. Diese Mutanten waren anschließend nicht mehr in der Lage auf Glukon...     »

In this work have been improved the method of the genetic modification of Gluconobacter oxydans and a selected enzyme of the metabolism were analyzed. For G. oxydans 621H and G. oxydans DSM7145 was established an upp-method, which was based on a 5-fluorouracil selection. By this method were constructed following mutants: transhydrogenase-, putative polyol dehydrogenase-, 6-phosphogluconate dehydratase- and KDPG-aldolase mutants. It has been shown that the Entner-Doudoroff pathway is important for the metabolism of gluconate by the reason that the 6-phosphogluconate dehydratase- as well as the KDPG aldolase mutants could not grow on gluconate-medium.     «

In this work have been improved the method of the genetic modification of Gluconobacter oxydans and a selected enzyme of the metabolism were analyzed. For G. oxydans 621H and G. oxydans DSM7145 was established an upp-method, which was based on a 5-fluorouracil selection. By this method were constructed following mutants: transhydrogenase-, putative polyol dehydrogenase-, 6-phosphogluconate dehydratase- and KDPG-aldolase mutants. It has been shown that the Entner-Doudoroff pathway is important f...     »