In der vorliegenden Dissertation wurden qualitative und 'Real Time PCR' Nachweisverfahren für die LibertyLink Rapssorte 'Falcon GS40/90' entwickelt, die eine transgene Toleranz gegen glufosinathaltige Herbizide besitzt. Zur allgemeinen Detektion von gentechnisch veränderten Pflanzen (GVP) wurde die DNA-Sequenz des 35S-Promotors genutzt, zum Nachweis des transgenen Konstruktes diente die Übergangsregion vom 35S-Promotor zum Phosphinothricinacetyltransferase- (pat) Gen und zur Normalisierung der Transgenanteile die DNA-Sequenz des S-glucosyltransferase-Gens. Die erstellten PCR Assays wurden mit Hilfe verschiedener genomischer und plasmidaler DNA-Kalibrierstandards hinsichtlich ihrer Richtigkeit und Sensitivität validiert. Als Parameter dienten die Wiederfindungsfunktion sowie die Nachweis- und Bestimmungsgrenzen. Zwei Methoden zur Berechnung von Nachweis- und Bestimmungsgrenzen wurden verglichen. Bei der Probenanalyse zeigte sich ein deutlicher Einfluss der Beschaffenheit der DNA-Kalibrierstandards auf die Richtigkeit der Quantifizierung. Diese Ergebnisse belegen das Potential plasmidaler DNA-Standards genomische Standards in der GVP-Analyse zu ersetzen. Im Anschluss an die Etablierung wurde die gesamte Methodik zur Quantifizierung unbeabsichtigt freigesetzter GVP und ihrer Nachkommen auf bayerischen Landwirtschaftsflächen eingesetzt. Mögliche Einflüsse auf die Persistenz von herbizidtolerantem Raps in der landwirtschaftlichen Umwelt werden diskutiert.     «

In der vorliegenden Dissertation wurden qualitative und 'Real Time PCR' Nachweisverfahren für die LibertyLink Rapssorte 'Falcon GS40/90' entwickelt, die eine transgene Toleranz gegen glufosinathaltige Herbizide besitzt. Zur allgemeinen Detektion von gentechnisch veränderten Pflanzen (GVP) wurde die DNA-Sequenz des 35S-Promotors genutzt, zum Nachweis des transgenen Konstruktes diente die Übergangsregion vom 35S-Promotor zum Phosphinothricinacetyltransferase- (pat) Gen und zur Normalisierung der T...     »

This dissertation concerns itself with the design of qualitative and real time PCR detection methods for the transgenic LibertyLink rapeseed line 'Falcon GS40/90', based herbicide-tolerant against gluphosinate. For screening a wide range of genetically modified plants (GMP), the DNA sequence of the 35S-promoter was used. The detection of the transgenic DNA construct was based on the junction region of the 35S-promoter to the phospinotricin acetyltransferase (pat) gen. Transgenic rates were calculated using the S-glucosyl transferase gen for normalisation. Accuracy and sensitivity of the developed PCR assays were validated using several genomic and plasmid DNA calibration standards. The validation parameters were the recovery rate as well as the detection and quantification limit. Two different methods for calculating the limit of detection and quantification were compared. The analysis of samples showed a distinct influence of the nature of the DNA calibration standards. This results showed the potential of plasmid calibration standards to substitute genomic DNA standards in GMP analysis. After establishing the whole methodology was used to quantify GMP and its progeny accidentally released on Bavarian agricultural fields. Possible influences on the persistence of herbicide tolerant rapeseed in the agricultural environment are discussed.     «

This dissertation concerns itself with the design of qualitative and real time PCR detection methods for the transgenic LibertyLink rapeseed line 'Falcon GS40/90', based herbicide-tolerant against gluphosinate. For screening a wide range of genetically modified plants (GMP), the DNA sequence of the 35S-promoter was used. The detection of the transgenic DNA construct was based on the junction region of the 35S-promoter to the phospinotricin acetyltransferase (pat) gen. Transgenic rates were calcu...     »