In dem ersten Teil der vorliegenden Arbeit (Studie 1) wurde der Einfluss von alpha-Tocopherol, Ascorbinsäure, Kaffeesäure und ausgewählten Flavonoiden (einzeln oder in unterschiedlichen Kombinationen) auf die kupfer-induzierte LDL-Oxidation untersucht. Die Kinetik der Lipidperoxidation wurde durch die Bildung konjugierter Diene verfolgt. Die Fragmentierung des Apolipoprotein B während LDL-Oxidation wurde durch den Verlauf der Tryptophanfluoreszenz und die Bildung von Carbonylgruppen gemessen. Es konnte beobachtet werden, dass die Phenolsäuren eine höhere antioxidative Aktivität als alpha-Tocopherol oder Ascorbinsäure besitzen. Die wirksamsten Antioxidantien waren Quercetin gefolgt von Epicatechin und Kaffeesäure. Bei Kombination von zwei verschiedenen Antioxidantien zeigten Quercetin und Kaffeesäure den stärksten Effekt auf die Verlängerung der lag-phase (244 %). In Studie 2 wurde der Konzentrationsverlauf von alpha-Tocopherol, Quercetin und Kaffeesäure in verschiedenen LDL-Präparationen untersucht. Dazu wurden die LDL zunächst mit den Substanzen inkubiert (allein oder in Kombination), die Oxidationsreaktion durch Zugabe von Kupferionen gestartet und die Konzentration der Antioxidantien zu unterschiedlichen Zeitpunkten mittels HPLC bestimmt. Quercetin wurde dabei am schnellsten verbraucht (3-16 % nach fünf Minuten). alpha-Tocopherol wurde etwas langsamer verbraucht als Quercetin, nach fünf Minuten konnte noch ein Tocopherolgehalt von 26-44 % gemessen werden. Kaffeesäure wurde deutlich langsamer verbraucht, nach fünf Minuten waren noch zwischen 90 und 100 % der Kaffeesäure vorhanden. In Studie 3 sollte der in Studie 1 beobachtete Synergieeffekt von Quercetin und Kaffeesäure bei kupfer-induzierter LDL-Oxidation näher untersucht werden. Dazu wurde die antioxidative Wirkung von Quercetin und Kaffeesäure auf die kupfer-induzierte LDL-Oxidation mit den strukturverwandten Substanzen Kaempferol, p-Cumarsäure und Dopamin verglichen. Es konnte festgestellt werden, dass Kaempferol (Verlängerung der lag-phase von 286%), p Cumarsäure (2 %) oder Dopamin (606 %) in dem hier verwendeten Versuchsansatz eine niedrigere antioxidative Aktivität besitzen als Quercetin (1053 %) und Kaffeesäure (730 %). Außerdem konnte gezeigt werden, dass nur die Kombination von Quercetin und Kaffeesäure eine antioxidative Aktivität aufwies, die über der Summe der Einzeleffekte lag. In Studie 4 sollten verschiedene Kaffeesäurederivate, die nach Kaffeekonsum im Urin von Testpersonen identifiziert wurden, auf ihre antioxidative Aktivität getestet werden.. Ferulasäure hatte in dem hier verwendeten Versuchsansatz sowohl prooxidative als auch antioxidative Wirkung, abhängig von der eingesetzten Konzentration. Liegt die Konzentration von Ferulasäure unter der Kupferkonzentration scheinen verstärkt prooxidative Reaktionen aufzutreten. Ist die Konzentration von Ferulasäure höher als die der Kupferionen scheint die antioxidative Wirkung verstärkt einzusetzen. Isoferulasäure und Dihydroferulasäure hatten eine prooxidative Aktivität und o Hydroxyhippursäure wirkte antioxidativ. In Studie 5 wurde die Wirkung von Zinkhistidin, Histidin und Zinksulfat auf die kupfer-induzierte LDL-Oxidation untersucht. Dazu wurde LDL mit Zinkhistidin, Histidin oder Zinksulfat inkubiert und anschließend der Verlauf der Dienkonjugation verfolgt. Zinksulfat hatte in dem hier verwendeten Versuchsansatz keine antioxidative Aktivität. Zinkhistidin und Histidin dagegen wiesen eine antioxidative Aktivität auf. In der Ernährung und im Organismus liegen Antioxidantien als komplexe Gemische vor. Die Ergebnisse der vorliegenden Arbeit zeigten eine kombinatorische Wirkung verschiedener Antioxidantien in vitro und können dazu beitragen die Bedeutung von Interaktionen zwischen einzelnen Antioxidantien auch in vivo besser zu verstehen.     «

In dem ersten Teil der vorliegenden Arbeit (Studie 1) wurde der Einfluss von alpha-Tocopherol, Ascorbinsäure, Kaffeesäure und ausgewählten Flavonoiden (einzeln oder in unterschiedlichen Kombinationen) auf die kupfer-induzierte LDL-Oxidation untersucht. Die Kinetik der Lipidperoxidation wurde durch die Bildung konjugierter Diene verfolgt. Die Fragmentierung des Apolipoprotein B während LDL-Oxidation wurde durch den Verlauf der Tryptophanfluoreszenz und die Bildung von Carbonylgruppen gemessen. Es...     »

In the first part of this work the influence of alpha-tocopherol, ascorbic acid, caffeic acid, and different flavonoids on the copper-mediated LDL-Oxidation was tested. The kinetics of lipidperoxiation were assessed by conjugated diene formation. The fragmentation of the apolipoprotein B during LDL-Oxidation was measured by tryptophan loss and protein carbonyl content. The phenolic acids showed higher antioxidant activity than alpha-tocopherol or ascorbic acid. Quercetin had the highest antioxidant activity followed by epicatechin and caffeic acid. When combinations of two antioxidants were tested, the combination of quercetin and caffeic acid was most effective by prolonging the lag-phase of LDL by 244 %. In the second part of this work, the content of alpha -tocopherol, quercetin, and caffeic acid in different LDL-preparations was measured. Therefore LDL was incubated with the different compounds (single compounds or combinations) and the oxidation was started by adding copper ions. Then concentrations of the antioxidants were measured at different times by HPLC. Quercetin was consumed at first (3-16 % after five minutes). alpha-tocopherol was consumed slower than quercetin, after five minutes 26-44 % were remaining. After five minutes 90-100 % of caffeic acid could still be measured. In the third part, the synergistic antioxidant activity of quercetin and caffeic acid, observed in the first part, was investigated more closely. Therefore the antioxidant activity of quercetin, caffeic acid, and structurally related compounds (dopamine, p-cumaric acid, kaempferol) was evaluated by measuring the inhibition of copper-mediated LDL-oxidation. The incubation of LDL with kaempferol (prolonging the lag-phase by 286 %), p-cumaric acid (2 %), or dopamine (606 %) showed lower antioxidant activities than incubation with quercetin (1053 %) or caffeic acid (730 %). Synergistic interactions were only found, when LDL was incubated with quercetin and caffeic acid. This effect was higher than the sum of the individual effects. In part four the antioxidant activity of different caffeic acid derivatives, that can be found in urine after consumption of coffee, was tested. Ferulic acid showed prooxidant as well as antioxidant activity, depending on the Concentration used. Concentrations lower than the copper concentration seem to enhance prooxidative reactions; is the concentration of ferulic acid higher than the copper concentration, antioxidant activity can be observed. Isoferulic acid and dihydroferulic acid showed prooxidant activity, and o-hydroxyhippuric acid had antioxidant activity. In part five of the study the effect of zinc histidine, histidine, and zinc sulphate on copper-mediated LDL-oxidation was tested. Therefore LDL was incubated with zinc histidine, histidine, and zinc sulphate and the increase of conjugated diene was was measured. Zinc sulphate showed no activity, whereas zinc histidine and histidine exerted antioxidant activity. In the diet and the organism, antioxidants can be found in complexe mixtures. The results showed combinative effects of different antioxidants in vitro and could provide a better understanding of the antioxidant interactions in vivo.     «

In the first part of this work the influence of alpha-tocopherol, ascorbic acid, caffeic acid, and different flavonoids on the copper-mediated LDL-Oxidation was tested. The kinetics of lipidperoxiation were assessed by conjugated diene formation. The fragmentation of the apolipoprotein B during LDL-Oxidation was measured by tryptophan loss and protein carbonyl content. The phenolic acids showed higher antioxidant activity than alpha-tocopherol or ascorbic acid. Quercetin had the highest antioxid...     »