In dieser Arbeit wurde ein wichtiger Regulator der Abscisinsäure (ABA)-Signalübertragung, die calciumabhängige Proteinkinase GCA2, charakterisiert. Untersucht wurden Calciumbindung, Kinaseaktivität und mögliche Substrate von GCA2. Die Proteinphosphatasen 2C ABI1 und ABI2, die ABA-Rezeptorproteine RCAR9 und RCAR11 sowie der Transkriptionsfaktor ABF1 wurden in vitro als Substrate von GCA2 ermittelt. Es wurde auch gezeigt, dass GCA2 durch die SnRK-Proteinkinase OST1 spezifisch phosphoryliert wird. Mittels Massenspektrometrie wurden Phosphorylierungsstellen in ABI2, ABF1 und GCA2 identifiziert. Aufgrund der Analyse von entsprechenden Phosphomimikmutationen ist von einem regulatorischen Einfluss von GCA2 auf ABF1, einer Stabilisierung der aktiven Konformation von GCA2 durch Autophosphorylierung sowie einer Regulation der Kinaseaktivität von GCA2 durch OST1 auszugehen. Zusätzlich wurden durch Screening einer chemisch mutagenisierten gca2 1-Population zwei neue Suppressormutanten isoliert, welche zur weiteren Analyse der ABA-GCA2-Wechselwirkungen genutzt werden können.     «

In dieser Arbeit wurde ein wichtiger Regulator der Abscisinsäure (ABA)-Signalübertragung, die calciumabhängige Proteinkinase GCA2, charakterisiert. Untersucht wurden Calciumbindung, Kinaseaktivität und mögliche Substrate von GCA2. Die Proteinphosphatasen 2C ABI1 und ABI2, die ABA-Rezeptorproteine RCAR9 und RCAR11 sowie der Transkriptionsfaktor ABF1 wurden in vitro als Substrate von GCA2 ermittelt. Es wurde auch gezeigt, dass GCA2 durch die SnRK-Proteinkinase OST1 spezifisch phosphoryliert wird....     »

The focus of this work was the characterization of the calcium-dependent protein kinase GCA2, which is an important regulator of abscisic acid (ABA)-signaling. The calcium-binding properties and kinase activity were analyzed as well as the phosphorylation of putative substrates by GCA2. It was possible to demonstrate the in vitro phosphorylation of the protein phosphatases 2C ABI1 and ABI2, the ABA-receptor proteins RCAR9 and RCAR11 and the transcriptional regulator ABF1. GCA2 itself was shown to be phosphorylated by the SnRK-type protein kinase OST1. Phosphorylation sites in ABI2, ABF1 and GCA2 were identified by mass spectrometry and subsequently analyzed using the corresponding phosphomimic mutations. Based on the behavior of the phosphomimic versions, a regulatory influence of GCA2 on ABF1 is postulated as well as the stabilization of the active conformation of GCA2 by autophosphorylation and the regulation of GCA2 kinase activity by OST1. In addition, screening of a chemically mutagenized gca2-1-population yielded two new suppressor mutants, which can be used for further investigation of the GCA2-ABA-interactions.     «

The focus of this work was the characterization of the calcium-dependent protein kinase GCA2, which is an important regulator of abscisic acid (ABA)-signaling. The calcium-binding properties and kinase activity were analyzed as well as the phosphorylation of putative substrates by GCA2. It was possible to demonstrate the in vitro phosphorylation of the protein phosphatases 2C ABI1 and ABI2, the ABA-receptor proteins RCAR9 and RCAR11 and the transcriptional regulator ABF1. GCA2 itself was shown t...     »