During my doctoral work I investigated and identified the link between the intronic restless legs syndrome (RLS)-association signal within MEIS1 and its functional correlate. MEIS1 is a highly conserved homeobox developmental gene. Through screening for conservation six highly conserved non-coding regions (HCNRs) with RLS-associated variants were identified in the associated 32 Kb locus. I have demonstrated that all six HCNRs are functional by dual luciferase assays. An allele-specific difference in reporter assays was present for two of them, HCNR 617 and HCNR 631, implying relevance of the associated variants for the RLS phenotype. Electrophoretic mobility shift assay verified for both HCNRs the differential formation of DNA-protein complexes, depending on the allele. Finally, affinity chromatography combined with mass spectrometry identified upstream factors that bind allele-specific and differentially, such as Creb1, Ybx1 and Otx3. All of them colocalized with Meis1 expression in the developing mouse forebrain and probably regulate the expression of Meis1 protein. These results open new insights into the pathophysiology of RLS.     «

During my doctoral work I investigated and identified the link between the intronic restless legs syndrome (RLS)-association signal within MEIS1 and its functional correlate. MEIS1 is a highly conserved homeobox developmental gene. Through screening for conservation six highly conserved non-coding regions (HCNRs) with RLS-associated variants were identified in the associated 32 Kb locus. I have demonstrated that all six HCNRs are functional by dual luciferase assays. An allele-specific differenc...     »

In meiner Doktorarbeit identifizierte ich die Verbindung zwischen dem intronischen Restless Legs Syndrome (RLS)-Assoziationssignal in MEIS1 und seinem funktionellen Korrelat. MEIS1 ist ein hochkonserviertes Homeobox-Entwicklungsgen. Durch das Screening auf Konservierung identifizierte ich sechs hochkonservierte nicht-kodierende Regionen (HCNRs) mit RLS-assoziierten Varianten in dem assoziierten 32 Kb Lokus. Ich bewies durch die Anwendung von Luciferase Assay, dass alle sechs HCNRs funktionell sind. In HCNR 617 und HCNR 631, stellte sich ein allelspezifischer Unterschied heraus. Die Analyse mit Band Shift Assay bestätigte, dass abhängig vom Allel für beide HCNRs eine differenzielle Entstehung von DNA-Proteinkomplexen vorliegt. Schließlich ermittelte ich durch Affinitätschromatographie und Massenspektrometrie Upstream-Faktoren wie Creb1, Ybx1 and Otx3, die allelspezifisch und differenziell bindeten. Alle Upstream-Faktoren kolokalisierten mit der Meis1-Expression im Vorderhirn von Mausembryonen und steuern wahrscheinlich dessen Expression. Diese Ergebnisse eröffnen neue Einblicke in die Pathophysiologie von RLS.     «

In meiner Doktorarbeit identifizierte ich die Verbindung zwischen dem intronischen Restless Legs Syndrome (RLS)-Assoziationssignal in MEIS1 und seinem funktionellen Korrelat. MEIS1 ist ein hochkonserviertes Homeobox-Entwicklungsgen. Durch das Screening auf Konservierung identifizierte ich sechs hochkonservierte nicht-kodierende Regionen (HCNRs) mit RLS-assoziierten Varianten in dem assoziierten 32 Kb Lokus. Ich bewies durch die Anwendung von Luciferase Assay, dass alle sechs HCNRs funktionell si...     »