Die chronische lymphatische Leukämie vom B-Zelltyp (B-CLL) ist charakterisiert durch fortschreitende maligne Akkumulation kleiner CD5 positiver B-CLL Zellen im peripheren Blut. Obwohl die peripheren B-CLL Zellen in der G0/frühen G1 Phase des Zellzyklus arretiert sind, werden proliferierende leukämische Zellen beschrieben, vorkommend als Pseudofollikel in so genannten Proliferationszentren in Lymphknoten und Knochenmark. Diese proliferativ aktiven Zellen scheinen von Bedeutung in Bezug auf die Progression der Erkrankung zu sein. Sie können sowohl Ausgangspunkt für Rezidive darstellen als auch den Pool der peripheren CLL Zellen erneuern. In der vorliegenden Arbeit wird anhand eines in vitro Modells (B-CLL Zellen stimuliert mit CpG-Oligonukleotiden zusammen mit Interleukin 2) der proliferative Anteil der B-CLL untersucht. Lactacystin, ein mikrobieller Metabolit, hemmt spezifisch die proteolytische Aktivität des Proteasoms. In dieser Arbeit wird gezeigt, dass Lactacystin in der Lage ist, hochselektiv in die Zellzyklus- und Apoptoseregulation sowohl proliferierender als auch ruhender B-CLL Zellen einzugreifen. Lactacystin inhibiert die Degradierung des cyclin dependent kinase (CDK) Inhibitors p27 bei aktivierten B-CLL Zellen. Die Hochregulation von Zyklin D2 und Zyklin D3 wird inhibiert, wohingegen die Expression von CDK2, CDK4 und Zyklin E unbeeinflusst bleibt. Lactacystin löst bei stimulierten als auch ruhenden B-CLL Zellen Apoptose aus. Dabei reagieren aktivierte B-CLL Zellen signifikant sensibler auf Lactacystin als ruhende B-CLL Zellen. Die Apoptoseinduktion wird begleitet durch den kompletten Verlust des mitochondrialen Membranpotentials. Desweiteren tritt eine Cleavage von Procaspase 3 auf. Z-VAD.fmk, ein Pancaspaseinhibitor, ist in der Lage die Cleavage von Procaspase 3 komplett zu hemmen, die Apoptoseinduktion jedoch nur zum Teil. Ein als proapoptotisches Protein beschriebenes 18kD Cleavageprodukt von bax akkumuliert bei mit Lactacystin behandelten Zellen. Im Gegensatz dazu kommt es zu keiner Änderung der Expression oder Cleavage von bcl-2. Die Cleavage von bax kann weder durch z-VAD.fmk, noch durch Calpeptin, einem Calpaininhibitor, gehemmt werden. Die Inhibition des Proteasoms durch Lactacystin löst hoch effektiv Apoptose bei proliferierenden B-CLL Zellen aus. Dabei werden caspaseabhängige sowie unabhängige Wege benutzt. Die Ergebnisse der Arbeit zeigen, dass Therapeutika mit Aktivität gegen das proliferative Kompartiment der B-CLL eine attraktive Ergänzung in der Therapie dieser meist unheilbaren Erkrankung darstellen können.
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Die chronische lymphatische Leukämie vom B-Zelltyp (B-CLL) ist charakterisiert durch fortschreitende maligne Akkumulation kleiner CD5 positiver B-CLL Zellen im peripheren Blut. Obwohl die peripheren B-CLL Zellen in der G0/frühen G1 Phase des Zellzyklus arretiert sind, werden proliferierende leukämische Zellen beschrieben, vorkommend als Pseudofollikel in so genannten Proliferationszentren in Lymphknoten und Knochenmark. Diese proliferativ aktiven Zellen scheinen von Bedeutung in Bezug auf die Pr...
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