Electrically actuated DNA layers are used for the label-free analysis of interactions of proteins in real-time on a chip. Short double stranded oligonucleotides are electrically switched on microelectrodes by alternating electric fields and their switching dynamics is measured in real-time by fluorescence energy transfer. Binding of proteins to modified DNA probes is detected by time-resolved measurements of dynamic motion. The human Carbonic Anhydrase 1 coupled to DNA probes enabled the kinetic characterization of monoclonal antibodies, quantifying the rate constants (kon, koff) and the dissociation constants (KD in the pM regime). Furthermore, the tumour suppressor p53 was characterized on surface based on its DNA-binding activity. Hereby, the binding kinetics of human full-length wild-type p53 was detected on DNA layers integrating p21 and half-p21 responsive elements.     «

Electrically actuated DNA layers are used for the label-free analysis of interactions of proteins in real-time on a chip. Short double stranded oligonucleotides are electrically switched on microelectrodes by alternating electric fields and their switching dynamics is measured in real-time by fluorescence energy transfer. Binding of proteins to modified DNA probes is detected by time-resolved measurements of dynamic motion. The human Carbonic Anhydrase 1 coupled to DNA probes enabled the kin...     »

Elektrisch schaltbare DNA Schichten werden für die markierungsfreie Analyse von Protein-Interaktionen in Echtzeit eingesetzt. Kurze DNA-Doppelstränge sind auf einer Gold Elektrode gebunden und ihre Orientierung auf der Oberfläche wird durch elektrische Felder beeinflusst (schalten), wobei deren Molekulardynamik mit Hilfe des Fluoreszenz‐Resonanzenergietransfers beobachtet wird. Die Bindung der Proteine zu den modifizierten DNA-Strängen wird durch zeitaufgelöste Messmethoden der Molekulardynamik untersucht. Die DNA‐Protein Konjugate mit humaner Carbonic Anhydrase 1 ermöglichen eine kinetische Charakterisierung der monoklonaler Antikörper, wobei die Ratekostanten (kon, koff), sowie die Dissozationskostante (KD in pM Bereich) bestimmt werden. Des Weiteren, wird die DNA-Bindung des Tumorsuppressorproteins p53 auf der Oberfläche charakterisiert. Hierbei wurde die Kinetik von p53 zu den p21 und half-p21 Konsensussequenzen untersucht.      «

Elektrisch schaltbare DNA Schichten werden für die markierungsfreie Analyse von Protein-Interaktionen in Echtzeit eingesetzt. Kurze DNA-Doppelstränge sind auf einer Gold Elektrode gebunden und ihre Orientierung auf der Oberfläche wird durch elektrische Felder beeinflusst (schalten), wobei deren Molekulardynamik mit Hilfe des Fluoreszenz‐Resonanzenergietransfers beobachtet wird. Die Bindung der Proteine zu den modifizierten DNA-Strängen wird durch zeitaufgelöste Messmethoden der Molekulardynamik...     »