B-CLL-Zellen sind langlebige Zellen, die aufgrund einer Apoptoseinhibition akkumulieren. Sie führen zu einer unzureichenden Immunantwort, bedingt durch die geringe Dichte an T-Zell-aktivierenden Oberflächenmolekülen. Durch CpG-ODN (bakterielle DNA) und IL-2 können diese Oberflächenmoleküle bei normalen und malignen B-Zellen hochreguliert sowie Proliferation und Sekretion von Immunglo-bulin und Zytokinen induziert werden. Diese Arbeit untersuchte die Expression der Oberflächenmoleküle CD 25, CD 40, CD 54, CD 58, CD 80, CD 86, MHC-Klasse-I und MHC-Klasse-II, die Produktion der Zytokine IL-6, IL-8 und TNF-alpha sowie die Sekretion von Ig M nach Stimulation mit CpG-ODN oder IL-2 bzw. Kostimulation mit CpG-ODN und IL-2 bei B-CLL-Zellen im Vergleich mit normalen B-Zellen. Folgende Methoden kamen zum Einsatz: Die Oberflächenmoleküle wurden mittels FACS-Analyse (Fluorescence Activated Cell Sorter) bestimmt, Immunglobulin M sowie die Zytokine wurden sowohl mit ELISAs nach dem Sandwichprinzip als auch mit einer RT-PCR auf mRNA-Ebene nachgewiesen. Zudem wurden Proliferationsassays durchgeführt. Bei den bestimmten Oberflächenmolekülen konnte für B-CLL-Zellen nach alleiniger IL-2-Stimulation kein Effekt nachgewiesen werden. Das CpG-ODN DSP 30 führte zur vermehrten Expression aller untersuchten Oberflächenmoleküle. Durch Kostimulation mit IL-2 und DSP 30 konnte bei allen Oberflächenmolekülen außer CD 58 zusätzlich zur Stimulation mit DSP 30 eine weitere Hochregulierung erreicht werden. Die gegenüber normalen B-Zellen reduzierte Proliferationsrate nach DSP 30-Stimulation konnte durch Kostimulation mit IL-2 und DSP 30 bei B-CLL-Zellen auf dieselbe Höhe gebracht werden wie bei normalen B-CLL-Zellen. Sowohl für die Sekretion von Ig M als auch von TNF-alpha und IL-6 wurde im ELISA eine Steigerung bei Kostimulation mit DSP 30 und IL-2 gegenüber der alleinigen DSP 30-Stimulation gezeigt. IL-2 alleine führte zu keiner Zunahme der Sekretion. Die Ergebnisse konnten qualitativ in der RT-PCR reproduziert werden. IL-8-Produktion war nicht induzierbar. Diese Resultate deuten auf eine verbesserte APC-Funktion von B-CLL-Zellen nach CpG-ODN- und IL-2-Stimulation durch vermehrte Expression von kostimulatori-schen Molekülen zusammen mit MHC-Klasse- I- oder MHC-Klasse- II-Molekülen und antigenen Determinanten wie z. B. verändertes Oberlächenimmunoglobulin hin und legen einen therapeutischen Einsatz in vivo oder in vitro nahe.     «

B-CLL-Zellen sind langlebige Zellen, die aufgrund einer Apoptoseinhibition akkumulieren. Sie führen zu einer unzureichenden Immunantwort, bedingt durch die geringe Dichte an T-Zell-aktivierenden Oberflächenmolekülen. Durch CpG-ODN (bakterielle DNA) und IL-2 können diese Oberflächenmoleküle bei normalen und malignen B-Zellen hochreguliert sowie Proliferation und Sekretion von Immunglo-bulin und Zytokinen induziert werden. Diese Arbeit untersuchte die Expression der Oberflächenmoleküle CD 25, CD 4...     »

B-CLL-cells are long living cells which accumulate because of inhibition of apoptosis. They cause an insufficient immune answer for low densitiy of T-cell-activating surface molecules. By CpG-ODN (bacterial DNA) and IL-2 expression of these surface molecules can be increased on malignant B cells as well as cell proliferation and secretion of immunoglobulin and cytokines can be induced. This work examined the expression of the surface molecules CD 25, CD 40, CD 54, CD 58, CD 80, CD 86, MHC class I and MHC class II, production of the cytokines IL-6, IL-8, TNF-alpha and secretion of IgM after stiumlation with CpG-ODN odr IL-2 or costimulation with CpG-ODN and IL-2 in B-CLL-cells compared with normal B-cells. These methods were used: FACS-Analysis (fluorescence activated cell sorter) for surface molecules, ELISAS for cytokines and IgM, RT-PCR and proliferation assay. There was no evident increase in the expression of surface molecules after stimulation with IL-2 only. The CpG-ODN DSP 30 caused a rise in the expression of all examined surface molecules. Costimulation with DSP 30 and IL-2 lead to an additional increase of all surface molecules except in CD 58. The reduced proliferation rate in B-CLL-cells could be restored to the rate of normal B-cells by costimuation with IL-2 and DSP 30. Secretion of IgM, TNF-alpha, and IL-6 was increased by costimulation with DSP 30 and IL-2 compared to stimulation with DSP 30 only. IL-2 alone did not have any effect. These results could be shown by ELISA tests and confirmed by RT-PCR. IL-8 could not be induced. These findings indicate an improved APC function of B-CLL-cells after stimulation with CpG-ODN and IL-2 by increased expression of costimulatory molecules together with MHC class I or II and antigenic determinants, e. g. altered surface immunoglobulin, and suggest CpG-ODN and IL-2 for therapeutic use in vivo or in vitro in B-CLL.     «

B-CLL-cells are long living cells which accumulate because of inhibition of apoptosis. They cause an insufficient immune answer for low densitiy of T-cell-activating surface molecules. By CpG-ODN (bacterial DNA) and IL-2 expression of these surface molecules can be increased on malignant B cells as well as cell proliferation and secretion of immunoglobulin and cytokines can be induced. This work examined the expression of the surface molecules CD 25, CD 40, CD 54, CD 58, CD 80, CD 86, MHC class...     »