Enzyme engineering enables the targeted optimization of natural enzymes. To efficiently test large numbers of variants, a microfluidic sorting system was developed in the course of this work. Three enzymes were optimized: BsGDH was mutated for improved xylose utilization, SsGDH was adapted to the artificial cofactor cNADP, and two ALDH enzymes were screened for enhanced thermostability. As a result, numerous improved variants could be identified.
Übersetzte Kurzfassung:
Enzymengineering erlaubt die gezielte Optimierung natürlicher Enzyme. Um große Variantenzahlen effizient zu testen, wurde im Rahmen dieser Arbeit ein mikrofluidisches Sortiersystem entwickelt. Drei Enzyme wurden optimiert: BsGDH erhielt Mutationen zur besseren Xylose-Verwertung, SsGDH wurde für den künstlichen Kofaktor cNADP angepasst und zwei ALDH-Enzyme auf verbesserte Thermostabilität gescreent. So konnten zahlreiche verbesserte Varianten identifiziert werden.