The focus of this thesis is the biophysical and biochemical characterization of Spire, an actin-binding protein that nucleates actin filaments. For this thesis, crystal structures of the complexes between the actin-binding WH2 repeats of Spire and actin were determined. Analysis of crystal packing of the actin complexes with SpireCD, SpireBCD, SpireABCD, and SpireDDD shows the presence of two types of assemblies that can serve as the actin filament nuclei. To distinguish between the two possible arrangements seen in the crystals, small angle X-ray scattering (SAXS) for several Spire-actin complexes in solution was carried out. The spatial arrangement of actin molecules in the Spire-actin structures and the SAXS data indicate the organization of an actin nucleation seed. Based on the obtained results, a model of actin nucleation was proposed.     «

The focus of this thesis is the biophysical and biochemical characterization of Spire, an actin-binding protein that nucleates actin filaments. For this thesis, crystal structures of the complexes between the actin-binding WH2 repeats of Spire and actin were determined. Analysis of crystal packing of the actin complexes with SpireCD, SpireBCD, SpireABCD, and SpireDDD shows the presence of two types of assemblies that can serve as the actin filament nuclei. To distinguish between the two possible...     »

Diese Arbeit konzentriert sich auf die biophysikalische und biochemische Charakterisierung von Spire, ein Aktin bindendes Protein, welches Aktinfilamente nukleiert. Für diese Arbeit wurden Kristallsturkturen der folgenden Komplexe zwischen Aktin und der aktinbindenden WH2-Wiederholung von Spire ermittelt. Die Analyse der Kristalldichte des Aktinkomplexes mit SpireCD, SpireBCD, SpireABCD and SpireDDD zeigt die Präsenz von zwei Aufbauarten. Um zwischen den zwei Möglichen Anordnungen, die man in den Kristallen sieht zu unterscheiden, wurde „small angle X-ray Scattering“ (SAXS) für mehrere Spire-Aktin Komplexe in Lösung durchgeführt. Die räumliche Anordnung der Aktin Moleküle in der Spire-Aktin Struktur und der SAXS Daten deuten auf einen Aufbau durch ein Aktin Nukleationskeim, welcher der Grundbaustein des Aktinfilaments darstellt. Basierend auf den gewonnenen Ergebnissen wurde ein Modell der Aktinnukleierung erstellt.     «

Diese Arbeit konzentriert sich auf die biophysikalische und biochemische Charakterisierung von Spire, ein Aktin bindendes Protein, welches Aktinfilamente nukleiert. Für diese Arbeit wurden Kristallsturkturen der folgenden Komplexe zwischen Aktin und der aktinbindenden WH2-Wiederholung von Spire ermittelt. Die Analyse der Kristalldichte des Aktinkomplexes mit SpireCD, SpireBCD, SpireABCD and SpireDDD zeigt die Präsenz von zwei Aufbauarten. Um zwischen den zwei Möglichen Anordnungen, die man in de...     »