In isolierten Parietalzellen der Ratte wurde der Einfluss von TNF-alpha, IL-1beta oder H2O2 auf den induzierbaren Transkriptionsfaktor NF-kappaB untersucht. Die Expression des TNF-alpha-Rezeptors TNFR1 wurde nachgewiesen. NF-kappaB war vorhanden und wurde zeit- und konzentrationsabhängig aktiviert durch Stimulation der Zellen mit H2O2 (bei 250µM 2,2-fache Zunahme nach 5min), TNF-alpha (10ng/ml; 1,8-fach; 30min) oder IL-1beta (10ng/ml; 2,6-fach; 60min). Die NF-kappaB-Untereinheiten p65 und p50 waren bei der raschen Aktivierung durch TNF-alpha beteiligt. Transfektion der Zellen mit Antisense-Oligonukleotiden gegen p65 unterdrückte diese Antwort. Die Untereinheit p52 war in diesen Zellen vorhanden, wurde aber nicht innerhalb von 60 Minuten durch TNF-alpha aktiviert. p52 hatte eine niedrige konstitutive Aktivität. Methoden wurden entwickelt, um hochreine Kernextrakte zu gewinnen, um Gel-shift-Experimente durchzuführen, und um ausgedehnte Serien dieser Experimente mit Hilfe eines PhosphorImager-Systems quantitativ auszuwerten.
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In isolierten Parietalzellen der Ratte wurde der Einfluss von TNF-alpha, IL-1beta oder H2O2 auf den induzierbaren Transkriptionsfaktor NF-kappaB untersucht. Die Expression des TNF-alpha-Rezeptors TNFR1 wurde nachgewiesen. NF-kappaB war vorhanden und wurde zeit- und konzentrationsabhängig aktiviert durch Stimulation der Zellen mit H2O2 (bei 250µM 2,2-fache Zunahme nach 5min), TNF-alpha (10ng/ml; 1,8-fach; 30min) oder IL-1beta (10ng/ml; 2,6-fach; 60min). Die NF-kappaB-Untereinheiten p65 und p5...
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