Toll-like Rezeptoren (TLRs, TLR1-TLR10) erkennen ein breites Spektrum von bakteriellen und viralen konservierten Strukturen (PAMPs, Pathogen assoziierten molekularen Mustern), unter anderem modifizierte Lipide (LPS und bakterielle Lipoproteine), Proteine (Flagellin) und Nukleinsäuren (DNA, ss und ds RNA). Im Rahmen dieser Arbeit sollten zur Charakterisierung von TLR9 monoklonale Antikörper gegen diesen Rezeptor generiert und geklärt werden, ob eine direkte Interaktion zwischen TLR9 und seinem Liganden CpG-DNA besteht. In TLR9 exprimierenden HEK 293 Zellen konnte mit Hilfe dieser Antikörper TLR9 in verschiedenen Testsystemen detektiert werden. TLR9 konnte im Gegensatz zu anderen Mitgliedern der TLR-Familie nicht auf der Zelloberfläche, sondern innerhalb der Zelle lokalisiert werden. Mit Hilfe der Surface Plasmon Resonance Technologie konnte darüberhinaus gezeigt werden, dass TLR9 direkt und sequenzspezifisch seinen Liganden einzelsträngige, unmethylierte CpG-DNA binden kann. Die TLR9-CpG-DNA Interaktion ist pH abhängig und zwar am stärksten bei Werten, die in Endosomen und Lysosomen herrschen (pH 6,5 bis 5,0).     «

Toll-like Rezeptoren (TLRs, TLR1-TLR10) erkennen ein breites Spektrum von bakteriellen und viralen konservierten Strukturen (PAMPs, Pathogen assoziierten molekularen Mustern), unter anderem modifizierte Lipide (LPS und bakterielle Lipoproteine), Proteine (Flagellin) und Nukleinsäuren (DNA, ss und ds RNA). Im Rahmen dieser Arbeit sollten zur Charakterisierung von TLR9 monoklonale Antikörper gegen diesen Rezeptor generiert und geklärt werden, ob eine direkte Interaktion zwischen TLR9 und seinem Li...     »

Toll-like receptors (TLRs, TLR1-TLR10) recognize a broad range of conserved bacterial and viral structures (PAMPs, pathogen associated molecular patterns) including modified lipids (LPS and bacterial lipopeptides), proteins (flagellin) and nucleic acids (DNA, ss and ds RNA). In this work monoclonal antibodies were generated to characterize TLR9 and a direct interaction between TLR9 and its ligand CpG-DNA was examined. In TLR9 expressing HEK 293 cells these antibodies could detect TLR9 in different test systems. In contrast to other members of the TLR-family, TLR9 could not be localized on the surface but intracellulary. In addition Biacore measurements revealed a direct and sequence specific binding of TLR9 to its ligand single stranded, unmethylated CpG-DNA. The TLR9-CpG-DNA interaction is pH dependent and occurs at the acidic pH found in endosomes and lysosomes (pH 6,5 to 5,0)     «

Toll-like receptors (TLRs, TLR1-TLR10) recognize a broad range of conserved bacterial and viral structures (PAMPs, pathogen associated molecular patterns) including modified lipids (LPS and bacterial lipopeptides), proteins (flagellin) and nucleic acids (DNA, ss and ds RNA). In this work monoclonal antibodies were generated to characterize TLR9 and a direct interaction between TLR9 and its ligand CpG-DNA was examined. In TLR9 expressing HEK 293 cells these antibodies could detect TLR9 in differe...     »