Das in dieser Arbeit durch Protein-Engineering des natürlichen Lipocalins BBP erzeugte Anticalin F1K27 komplexiert den fluoreszierenden Haptenliganden Doxorubicin, ein Anthrazyklin-Chemotherapeutikum, mit einer Dissoziationskonstante im niedrigen mikromolaren Bereich. Der Nachweis der Komplexbildung wurde dabei durch die ausgeprägte Neigung des Liganden zur Selbstassoziation erschwert. Versuche, das Anticalin F1K27 mittels in vitro Affinitätsmaturierung zu verbessern, blieben erfolglos. Daher wurde ein Fermentationsverfahren für die Variante F1K27 etabliert, um eine zukünftige Kokristallisation des Anticalins mit dem Liganden Doxorubicin zum Zweck der Strukturanalyse vorzubereiten.     «

Das in dieser Arbeit durch Protein-Engineering des natürlichen Lipocalins BBP erzeugte Anticalin F1K27 komplexiert den fluoreszierenden Haptenliganden Doxorubicin, ein Anthrazyklin-Chemotherapeutikum, mit einer Dissoziationskonstante im niedrigen mikromolaren Bereich. Der Nachweis der Komplexbildung wurde dabei durch die ausgeprägte Neigung des Liganden zur Selbstassoziation erschwert. Versuche, das Anticalin F1K27 mittels in vitro Affinitätsmaturierung zu verbessern, blieben erfolglos. Daher wu...     »

The anticalin FK27, which was generated during this doctoral thesis via protein-engineering of the naïve lipocalin BBP binds the fluorescent hapten Doxorubicin with a dissociation constant in the low micromolar range. Detection of this complexation was hindered by the ligands tendency to self-association. Attempts to improve the binding of the anticalin by in vitro affinity maturation failed. Therefore a fermentation procedure for the variant F1K27 has been established in order to prepare the co-crystallization of the anticalin in complex with the ligand for use in subsequent structural analysis.      «

The anticalin FK27, which was generated during this doctoral thesis via protein-engineering of the naïve lipocalin BBP binds the fluorescent hapten Doxorubicin with a dissociation constant in the low micromolar range. Detection of this complexation was hindered by the ligands tendency to self-association. Attempts to improve the binding of the anticalin by in vitro affinity maturation failed. Therefore a fermentation procedure for the variant F1K27 has been established in order to prepare the co...     »