Despite the many methods available to study protein folding and aggregation in vitro, there are relatively few tools available to study these processes in the cell. To enable the assessment of protein stability and solubility in vivo, we describe here a biosensor system based on sensitivity to antibiotics that can be used in the cytosol of Saccharomyces cerevisiae. We show an application of the biosensor to determine the in vivo stability or aggregation propensity of stability variants of immunity protein 7, yeast prion proteins Sup35 and Rnq1, as well as the misfolding disease-associated proteins amyloid beta 1-42 (Aβ42) and α-synuclein.
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Despite the many methods available to study protein folding and aggregation in vitro, there are relatively few tools available to study these processes in the cell. To enable the assessment of protein stability and solubility in vivo, we describe here a biosensor system based on sensitivity to antibiotics that can be used in the cytosol of Saccharomyces cerevisiae. We show an application of the biosensor to determine the in vivo stability or aggregation propensity of stability variants of immuni...
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Translated abstract:
Trotz der vielen Methoden, die zur Untersuchung der Proteinfaltung und -aggregation in vitro zur Verfügung stehen, gibt es relativ wenige Mittel, um diese Prozesse in der Zelle zu untersuchen. Um die Bewertung der Proteinstabilität und -löslichkeit in vivo zu ermöglichen, beschreiben wir hier ein Biosensorsystem, das auf der Empfindlichkeit gegenüber Antibiotika basiert und im Zytosol von Saccharomyces cerevisiae eingesetzt werden kann. Wir zeigen eine Anwendung des Biosensors zur Bestimmung der in vivo Stabilität oder der Aggregationsneigung von Stabilitätsvarianten des Immunproteins 7, der Hefeprionen-Proteine Sup35 und Rnq1 sowie der fehlgefalteten krankheitsassoziierten Proteine Amyloid beta 1-42 (Aβ42) und α-synuclein.
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Trotz der vielen Methoden, die zur Untersuchung der Proteinfaltung und -aggregation in vitro zur Verfügung stehen, gibt es relativ wenige Mittel, um diese Prozesse in der Zelle zu untersuchen. Um die Bewertung der Proteinstabilität und -löslichkeit in vivo zu ermöglichen, beschreiben wir hier ein Biosensorsystem, das auf der Empfindlichkeit gegenüber Antibiotika basiert und im Zytosol von Saccharomyces cerevisiae eingesetzt werden kann. Wir zeigen eine Anwendung des Biosensors zur Bestimmung der...
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