in vitro enzymatic cascade reaction, enzyme engineering, enzyme characterization
Translated keywords:
in vitro Emzymkaskade, Enzym Engineering, Enzym Charakterisierung
Abstract:
An in vitro enzymatic cascade reaction was developed in order to provide 1,4-butanediol in a sustainable way from renewable resources. In this work, different topics for establishing this cascade reaction were investigated. (1) alcohol dehydrogenase from Sphingomonas sp. A1 was identified for the non-natural oxidation of D-gluconate to D-glucarate and characterized in detail. (2) For the regeneration of NAD+ NADH oxidase from Lactobacillus pentosus was characterized and applied. (3) uronate dehydrogenase was engineering for enhanced stability. (4) Two in vitro enzymatic cascade reactions were set up and analyzed.
Translated abstract:
Es wurde eine in vitro Enzymkaskadenreaktion entwickelt, um 1,4-Butandiol nachhaltig aus erneuerbaren Rohstoffen herzustellen. In dieser Arbeit wurden verschiedene Aspekte hin zur Etablierung dieser Kaskadenreaktion betrachtet. (1) Eine Alkoholdehydrogenase aus Sphingomonas sp. A1 wurde für die nicht-natürliche Oxidation von D-gluconate zu D-glucarate identifieziert und detailliert charakterisiert. (2) Für die Regeneration des Cofaktors NAD+ wurde die NADH Oxidase aus L. pentosus analysiert und angewendet. (3) Eine Uronatdehydrogenase wurde durch Enzym-Engineering hinsichtlich ihrer Stabilität verbessert. (4) Zwei in vitro Enzymkaskadenreaktionen wurden aufgestellt und analysiert.
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