HINTERGRUND UND FRAGESTELLUNG DER ARBEIT: Zelluläre Immunvakzine, insbesondere gegen Tumorkrankheiten, sind heute zu einer anwendbaren und hoffnungsvollen Therapieoption geworden. Immer wieder trüben die mangelnde Immunkompetenz des Rezipienten mit fortgeschrittenem Tumorleiden und Suppressionsmechanismen der Vakzine selbst den Erfolg dieser Technologien. Die vorliegende Arbeit sollte mögliche Mechanismen der Immunsuppression bei Generierung zellulärer Vakzine beleuchten und ein in vitro Testsystem zur Charakterisierung gängiger Pharmaka bezüglich ihrer immunmodulierenden Wirkung auf Vakzinezellen entwickeln. METHODEN: Grundelement des in vitro Modells ist eine gemischte Leukozytenreaktion (MLR), welcher vorbehandelte Regulatorzellen zugesetzt werden. Als relevante, abhängige Variable der Beobachtungseinheit mononukleäre Zellen des peripheren Blutes (PBMC) wurden Proliferation auf allospezifische (MLR) und polyklonale Lektinstimulation (Concanavalin A und/oder Phytohämagglutinin) sowie zellvermittelte Lympholyse blastentransformierter Zielzellen definiert. Die unabhängige Variable war eine 48-stündige Vorinkubation von ruhenden bzw. lektinstimulierten Regulatorzellen mit immunmodulierenden Pharmaka. Die Inaktivierung der Regulatorzellen mit Mitomycin C erfolgte alternierend vor oder nach der Vorinkubation, um die Abhängigkeit der Reaktion von der Proliferationsfähigkeit der Regulatorzellen zu testen. ERGEBNISSE: Kontaktinhibition der Lymphozyten durch hohe Zellkonzentrationen (>1 Mio Zellen / ml) oder Zentrifugation mit hoher Gravitation (> 400 g) sowie kritisches Responder-Stimulator-Verhältnis (R:S = 1) supprimieren Proliferation und zellvermittelte Zytotoxizität. Die Inaktivierung der Regulatorzellen mit Mitomycin C bewirkt eine Steigerung der zellvermittelten Zytotoxizität, die in der regulierten Immunreaktion generiert wurde. Propranolol und Tolbutamid potenzieren, Blocker der H2-histaminergen und D2-dopaminergen Rezeptoren supprimieren die Funktion der Regulatorzellen. Cyclooxygenasehemmer waren ohne statistisch signifikante Wirkung. DISKUSSION: Die vorliegende Arbeit legt die wissenschaftliche Etablierung eines Testsystems zur Charakterisierung der immunmodulierenden Wirkung von Pharmaka auf Regulatorzellen einer MLR dar. Immunstimulierende Effekte konnten für Propranolol und Tolbutamid nachgewiesen werden. Als mögliche Mechanismen der Immunsuppression einer zellulären Vakzine wurden Zellkontaktinhibition sowie äquipotente Spender in der MLR aufgedeckt. Erstmals konnte die immunpotenzierende Wirkung von Mitomycin C auf Regulatorzellen in vitro gezeigt werden.     «

HINTERGRUND UND FRAGESTELLUNG DER ARBEIT: Zelluläre Immunvakzine, insbesondere gegen Tumorkrankheiten, sind heute zu einer anwendbaren und hoffnungsvollen Therapieoption geworden. Immer wieder trüben die mangelnde Immunkompetenz des Rezipienten mit fortgeschrittenem Tumorleiden und Suppressionsmechanismen der Vakzine selbst den Erfolg dieser Technologien. Die vorliegende Arbeit sollte mögliche Mechanismen der Immunsuppression bei Generierung zellulärer Vakzine beleuchten und ein in vitro Testsys...     »

INTRODUCTION: Cellular immune vaccination strategies for treatment of cancer have developed to a feasable and hopeful therapeutic option. But the success of these technologies is still hampered by the immunoincompetence of the recipients suffering from advanced cancer and by immunosuppression of the vaccine cells itself. This thesis describes a new test method evaluating common pharmaceutical drugs for their immunomodulatory potency on vaccine cells. METHODS: The model is based on a mixed leukocyte reaction (MLR), to which regulator cells were added. Incubation of either resting or proliferating cells with immunomodulating drugs influenced a secondary MLR. Proliferation of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) upon lectin or allogeneic stimulation and cell mediated cytotoxicity of PHA generated target cells were determined. Inactivation of regulator cells by mitomycin C was performed either before or after this preincubation period. RESULTS: Cell-cell-contact induced either by high cell concentrations (> 1 million cells/ml) or spin down at high gravities (> 400 g) as well as a critical responder-stimulator-ratio (R:S=1) caused descrease in proliferation and cell mediated cytotoxicity. The inactivation of the regulator cells by mitomycin C resulted in an increase of cell mediated cytotoxicity after the regulated secondary MLR. Propranolol and tolbutamide promote, blockers of H2-histamine and D2-dopamine receptors suppress regulator cell function. COX2 inhibitors showed no statistically significant effects. DISCUSSION: These study describes the scientific evaluation of a new test method for the characterization of the effect of immunomodulatory drugs on regulator cells. Propranolol and tolbutamide were shown to cause immunopotentiation. Immunosuppression present in cellular vaccines can be due to cell-cell contact inhibition as well as due to suppressive donor-recipient cell ratio. For the first time we demonstrate the immunostimulatory effect of mitomycin C on regulator cells in vitro.     «

INTRODUCTION: Cellular immune vaccination strategies for treatment of cancer have developed to a feasable and hopeful therapeutic option. But the success of these technologies is still hampered by the immunoincompetence of the recipients suffering from advanced cancer and by immunosuppression of the vaccine cells itself. This thesis describes a new test method evaluating common pharmaceutical drugs for their immunomodulatory potency on vaccine cells. METHODS: The model is based on a mixed leukoc...     »