Anticalin, protein engineering, PASylation, pretargeting, radiodiagnostics
TUM classification:
CHE 800d
Abstract:
Bifunktionelle Proteine bieten vielversprechende Reagenzien zur Radiodiagnostik/-therapie von Krebserkrankungen gemäß dem Pretargeting-Konzept. Nach rationaler Optimierung wurde ein neuartiges Bindeprotein („Anticalin“) mit pM Affinität für Me·DTPA-CHX-A'' über ein PAS-Polypeptid mit einem anderen Anticalin (Antigen: Fn ED-B) bzw. einem scFv (Antigen: CEA) fusioniert und in dieser Form biochemisch charakterisiert. Pretargeting des Tumors wurde in Mausstudien unter Einsatz eines bivalenten Radiochelats, (Lu·DTPA)2, für das scFv-Anticalin nachgewiesen. Zudem wurden ChromoCaline (Anticalin-eGFP-Fusionen) als Reagenzien für die fluoreszenzbasierte Zelldiagnostik hergestellt.
Translated abstract:
Bifunctional proteins constitute promising tools for radiodiagnostics/-therapy of tumor diseases according to the pretargeting concept. A rationally engineered novel binding protein („Anticalin“) with pM affinity for Me·DTPA-CHX-A'' was fused to an Anticalin (antigen: Fn ED-B) as well as a scFv (antigen: CEA), respectively, using a PAS-polypeptide and was characterized in this format in biochemical assays. For the scFv/Anticalin fusion protein, tumor pretargeting was shown in mouse studies in which a bivalent radiochelate, (Lu·DTPA)2, was applied as tracer. Moreover, ChromoCalins (Anticalin-eGFP fusion proteins) were constructed as reagents for fluorescence-based cell diagnostics.