Ziel: Nachweis der Akkumulation von intravenös injizierten, Eisenoxid- oder [18F]FDG markierten zytotoxischen T-Lymphozyten (NK-92) in HER2/neu positiven NIH3T3 Tumoren mittels Magnetresonanztomographie (MRT) und Autoradiographie. Material und Methoden: NK-92-Zellen, die nicht gegen HER2/neu gerichtet sind, und genetisch modifizierte NK-92-scFv(FRP5)-zeta-Zellen, die einen für das HER2/neu Antigen spezifischen chimären Antigenrezeptor exprimieren, wurden mit Ferucarbotran oder mit [18F]FDG markiert. Die Effektivität der Markierung wurde mittels Bildgebung, Berliner-Blau Färbung und Spektrometrie bewertet und optimiert. Fünfzehn Balb/c-Mäusen wurden HER2/neu positive NIH-3T3 Tumore subkutan in die rechte Milchleiste implantiert. Als die Tumore einen Durchmesser von etwa 1 cm erreicht hatten, wurden sechs Mäusen jeweils 5x106 Ferucarbotran-markierte NK-92-Zellen (n=3) oder NK-92-scFv(FRP5)-zeta-Zellen (n=3) intra-venös injiziert. Die Tumor-Akkumulation dieser Zellen wurde an einem klinischen 1.5 T MRT-Scanner mit T1- und T2*-FFE-Sequenzen vor, 12 und 24h nach Zellinjektion (p.i.) untersucht. Zusätzlich wurden neun Mäusen 5x106 [18F]FDG markierte NK-92-Zellen (n=2) oder NK-92-scFv(FRP5)-zeta-Zellen (n=7) injiziert. Die Tumor-Akkumulation der [18F]FDG markierten Zellen wurde mittels Autoradiographie ex vivo 1h und 2h p.i. dokumentiert. Alle Ergebnisse wurden mit Histopathologien der Tumoren verglichen. Ergebnisse: Nach Injektion der NK-92-scFv(FRP5)-zeta-Zellen, die gegen das HER2/neu Antigen gerichtet sind, zeigte die MRT einen progressiven, ausgeprägten Signalabfall und die Autoradiographie einen deutlich erhöhten [18F]FDG Tracer Uptake in den HER2/neu positiven Tumoren. Dagegen verursachte eine Injektion der NK-92-Kontrollzellen, die nicht gegen das HER2/neu Antigen ge-richtet sind, keine Veränderung der MRT-Signalintensität und keinen nachweis-baren [18F]FDG Uptake des Tumorgewebes. Die Anti-CD57-Immunhistochemie bestätigte eine Akkumulation der NK-92-scFv(FRP5)-zeta-Zellen, aber keine Akkumulation der NK-92-Zellen im Tumorgewebe. Schlussfolgerung: NK-92-Zellen können effizient mit klinisch zugelassenen Eisenoxiden und radioaktiven Tracern markiert werden. Die Akkumulation dieser markierten Zellen in Tumoren kann mittels Bildgebung nachgewiesen werden. Die hier vorgestellten Techniken wären klinisch anwendbar und könnten verwendet werden, um NK-zellbasierte Immuntherapien bei entsprechenden Patienten nichtinvasiv mit bildgebenden Methoden zu dokumentieren und zu kontrollieren.      «

Ziel: Nachweis der Akkumulation von intravenös injizierten, Eisenoxid- oder [18F]FDG markierten zytotoxischen T-Lymphozyten (NK-92) in HER2/neu positiven NIH3T3 Tumoren mittels Magnetresonanztomographie (MRT) und Autoradiographie. Material und Methoden: NK-92-Zellen, die nicht gegen HER2/neu gerichtet sind, und genetisch modifizierte NK-92-scFv(FRP5)-zeta-Zellen, die einen für das HER2/neu Antigen spezifischen chimären Antigenrezeptor exprimieren, wurden mit Ferucarbotran oder mit [18F]FDG mar...     »

Purpose: Monitoring of the accumulation of intravenously injected, iron-oxide or [18F]FDG labeled human natural killer (NK) cell line NK-92 in HER2/neu positive NIH3T3 tumors with magnetic resonance (MR) imaging and autoradiography. Materials and methods: NK-92 cells, not directed against HER2/neu recep-tors, and genetically modified NK-92-scFv(FRP5)-zeta cells, expressing a chimeric antigen receptor specific to the tumor-associated HER2/neu antigen, were labeled with Ferucarbotran or [18F]FDG. Labeling efficiency was evaluated and optimized by imaging, prussian blue stains and spectrometry. HER2/neu positive NIH-3T3 mammary tumors were implanted in the mammary fat pad of fifteen Balb/c mice. When the size of the tumors was about 1cm in diameter, 5×106 Ferucarbotran-labeled NK-92 cells (n=3) or NK-92-scFv(FRP5)-zeta cells (n=3) were intravenously injected into six mice. The accumulation of these cells was monitored by a clinical 1.5 T MR-scanner with T1- and T2*-FFE-sequences before, 12 and 24h after cell injection (p.i.). In addition 5×106 [18F]FDG labeled NK-92 cells (n=2) or NK-92-scFv(FRP5)-zeta cells (n=7) were intravenously injected into nine mice. The accumulation of the [18F]FDG labeled cells was monitored by autoradiography ex vivo 1h and 2h after cell injection. All data were correlated with histopathology. Results: After injection of NK-92-scFv(FRP5)-zeta cells, directed against HER2/neu antigen, MR showed a progressive signal decline and Autoradiography showed a significantly increased [18F]FDG tracer uptake in HER2/neu-positive tumors. Conversely, injection of NK-92 control cells, not directed against HER2/neu antigen, did not cause significant MR-signal intensity changes and did not cause increased [18F]FDG uptake of the tumor tissue. Anti-CD57 immunohistochemistry stains confirmed an accumulation of the NK-92-scFv(FRP5)-zeta cells, but not of NK-92 cells in the tumor tissue. Conclusion: The human natural killer cell line NK-92 can be efficiently labeled with clinically applicable iron-oxide and nuclear contrast agents. The accumula-tion of these labeled cells in tumors can be monitored. The presented cell tracking techniques may be applied to document and monitor NK-cell based immunotherapies in corresponding patients non-invasively.      «

Purpose: Monitoring of the accumulation of intravenously injected, iron-oxide or [18F]FDG labeled human natural killer (NK) cell line NK-92 in HER2/neu positive NIH3T3 tumors with magnetic resonance (MR) imaging and autoradiography. Materials and methods: NK-92 cells, not directed against HER2/neu recep-tors, and genetically modified NK-92-scFv(FRP5)-zeta cells, expressing a chimeric antigen receptor specific to the tumor-associated HER2/neu antigen, were labeled with Ferucarbotran or [18F]FDG...     »