In der vorliegenden experimentellen Arbeit wurde der Effekt von drei verschiedenen Wachstumsfaktoren, Transforming growth factor a (TGFa), Vascular endothelial growth factor (VEGF) und Insulin-like growth factor 1 (IGF-1), auf die Proliferation zweier verschiedener Populationen menschlicher Meniskuszellen gemessen. Unter Verwendung von 16 Menisci aus 4 weißen Neuseeland Kaninchen wurde zunächst das Verhalten von Menisci in einer Gewebekultur untersucht. Die steril entnommenen Kaninchen-Menisci wurden dabei in einem Nährmedium in vitro inkubiert und nach 1,2,3 und 4 Wochen unter Verwendung einer Doppel-Fluorochromierung histologisch untersucht. Die Doppelfärbung mit MTT (Tetrazolium Salz) und Ethidium Bromid wurde neu etabliert und ermöglichte in den histologischen Präparaten die Unterscheidung zwischen vitalen und avitalen Zellen. Das Experiment zeigte, dass es unter Bedingungen in-vitro zu einem kompletten Abwandern der oberflächlichen Meniskuszellen kommt, während die in den tieferen Schichten liegenden Zellen im Meniskusgewebe verbleiben. Diese neue Erkenntnis wurde im zweiten Teil der Arbeit zur Trennung von oberflächlichen und tiefen humanen Fibrochondrozyten aus Meniskusbiopsien von 6 Patienten mit irreparablen Korbhenkelrupturen, 2 Frauen und 4 (Mittelwert 34 Jahre) verwendet. Nach 4 Wochen in Gewebekultur wurden die tiefen Fibrochondrozyten enzymatisch aus den Menisci, die oberflächlichen vom Boden der Kulturflaschen gewonnen, bis zur zweiten Passage gezüchtet und anschließend im serumlosen Medium mit den Wachstumsfaktoren TGFa, VEGF und IGF-1 in 6 verschiedenen Konzentrationen (0, 0.01, 0.1, 1, 10 und 100 ng/ml) inkubiert. Die Zellzählung wurde nach 96 Stunden maschinell durchgeführt. Die Proliferation der oberflächlichen und tiefen humanen Fibrochondrozyten wurde konzentrationsabhängig signifikant durch TGFa gesteigert. Die mitogene Wirkung von VEGF konnte dagegen nur die Population der tiefen Fibrochondrozyten nachgewiesen werden, während IGF-1 keinen signifikanten Effekt auf die menschlichen Meniskuszellen zeigte. Somit konnte erstmals, nach bereits bekannten morphologischen Unterschieden zwischen meniskalen Fibrochondrozyten, auch ein unterschiedliches regionales proliferatives Verhalten von oberflächlichen und tiefen Fibrochondrozyten nachgewiesen werden.     «

In der vorliegenden experimentellen Arbeit wurde der Effekt von drei verschiedenen Wachstumsfaktoren, Transforming growth factor a (TGFa), Vascular endothelial growth factor (VEGF) und Insulin-like growth factor 1 (IGF-1), auf die Proliferation zweier verschiedener Populationen menschlicher Meniskuszellen gemessen. Unter Verwendung von 16 Menisci aus 4 weißen Neuseeland Kaninchen wurde zunächst das Verhalten von Menisci in einer Gewebekultur untersucht. Die steril entnommenen Kaninchen-Menisci w...     »

In this experimental study, the effect of three different growth factors, Transforming growth factor a (TGFa), Vascular endothelial growth factor (VEGF) and Insulin-like growth factor 1 (IGF-1) was evaluated on the proliferation of two different populations of human meniscal fibrochondrocytes. Using 16 menisci from 4 New Zeeland White rabbits, first the behavior of menisci in the tissue culture was investigated. The rabbit menisci were harvested, cultured in vitro and histologically analyzed after 1,2,3 and 4 weeks with a double-staining procedure. The new established double-staining, performed with MTT (tatrazolium salt) and Ethidium bromid, enabled the differentiation between vital and avital cells in the histological specimen. The experiment demonstrated that, under in vitro conditions, the superficial cells completely move out of the menisci, while the cells from the deep layers stay in the meniscal tissue. These new findings were used in the second part of the experiment to separate superficial and deep fibrochondrocytes from 6 human meniscal biopsies (2 women, 4 men with irreparable meniscal bucket-handle lesions, mean age 34 years). After 4 weeks in tissue culture, the superficial cells were sampled from the well plates and the deep fibrochondrocytes were extracted from the meniscal tissue. The cells were then cultured in the second passage, placed in a serumless medium and incubated with the growth factors TGFa, VEGF and IGF-1 in 6 different concentrations (0, 0.01, 0.1, 1, 10 and 100 ng/ml). The cell counts were performed with Coulter counter after 96 h. The proliferation of the superficial and deep human fibrochondrocytes was significantly enhanced by TGFa. The mitogenic effect of VEGF was shown only for the population of the deep fibrochondrocytes while IGF-1 had no significant effect on the human meniscal cells. For the first time, differentiation of meniscal cells from different regions of the meniscus was possible due to their mitotic activity.     «

In this experimental study, the effect of three different growth factors, Transforming growth factor a (TGFa), Vascular endothelial growth factor (VEGF) and Insulin-like growth factor 1 (IGF-1) was evaluated on the proliferation of two different populations of human meniscal fibrochondrocytes. Using 16 menisci from 4 New Zeeland White rabbits, first the behavior of menisci in the tissue culture was investigated. The rabbit menisci were harvested, cultured in vitro and histologically analyzed aft...     »