Die Proteine der Ypt-Familie spielen eine regulatorische Rolle bei der Ausbildung und dem Transport von Vesikeln zwischen Zellkompartimenten und beim Fusionieren mit einer Akzeptormembran. Defekte der Transportnetzwerke führen zu schweren Krankheiten, wie Choroideremia oder dem Griscelli-Syndrom. Um das Verständnis der Regulation des vesikulären Transports zu verbessern, wurden Protein-DNA-Konjugate der Ypt-Familie hergestellt, über die DNA-gerichtete Immobilisierung auf DNA-Mikroarrays aufgebracht und Bindungspartner mittels Fluorszenz und Massenspektrometrie untersucht. Die Thymidinmonophosphatkinase katalysiert die Übertragung einer Phosphatgruppe von ATP auf TMP. Das Enzym wurde aus einem synthetischen N-terminalen und einem rekombinanten C-terminalen Segment hergestellt. Dadurch wird es möglich spezifische Variationen im aktiven Zentrum vorzunehmen, um den Phosphatgruppenübertragungsmechanismus zu untersuchen.      «

Die Proteine der Ypt-Familie spielen eine regulatorische Rolle bei der Ausbildung und dem Transport von Vesikeln zwischen Zellkompartimenten und beim Fusionieren mit einer Akzeptormembran. Defekte der Transportnetzwerke führen zu schweren Krankheiten, wie Choroideremia oder dem Griscelli-Syndrom. Um das Verständnis der Regulation des vesikulären Transports zu verbessern, wurden Protein-DNA-Konjugate der Ypt-Familie hergestellt, über die DNA-gerichtete Immobilisierung auf DNA-Mikroarrays aufgebra...     »

The Ypt protein family plays a regulatory role in vesicle formation and transport between cell compartments and in fusion thereof with acceptor membranes. Defects within these transport networks lead to diseases like Choroideremia or the Griscelli syndrome. To improve the understanding of vesicular transport regulation, protein-DNA conjugates of Ypt proteins were generated and coupled to DNA-microarrays via DNA-directed immobilization. Binding partners were analyzed by fluorescence readout and mass spectrometry. Thymidinemonophosphate kinase catalyses the phosphate transfer from ATP to TMP. The enzyme was assembled from a synthetic N-terminal and a recombinant C-terminal segment. This allows for specific modifications at the active site to study the phosphate group transfer mechanism.      «

The Ypt protein family plays a regulatory role in vesicle formation and transport between cell compartments and in fusion thereof with acceptor membranes. Defects within these transport networks lead to diseases like Choroideremia or the Griscelli syndrome. To improve the understanding of vesicular transport regulation, protein-DNA conjugates of Ypt proteins were generated and coupled to DNA-microarrays via DNA-directed immobilization. Binding partners were analyzed by fluorescence readout and m...     »