We coexpressed and copurified recombinant yeast class II HDAC complex from bacteria as a functionally active and trichostatin-A (TSA)-sensitive heterotetrameric Hda1 complex. We characterized the interaction of the HDAC complex with either single-stranded or double-stranded DNA and identified the N-terminal halves of scHda2p and scHda3p as binding modules. A high resolution structure of the scHda3p DNA-binding domain (DBD3) by X-ray crystallography is presented. We have succeeded in solving the crystal structure of Sap5 in complex with pepstatin-A at 2.5Å resolution. This facilitates comparison of structural details as well as inhibitor binding modes among the different subgroup members Sap4-6.     «

We coexpressed and copurified recombinant yeast class II HDAC complex from bacteria as a functionally active and trichostatin-A (TSA)-sensitive heterotetrameric Hda1 complex. We characterized the interaction of the HDAC complex with either single-stranded or double-stranded DNA and identified the N-terminal halves of scHda2p and scHda3p as binding modules. A high resolution structure of the scHda3p DNA-binding domain (DBD3) by X-ray crystallography is presented. We have succeeded in solving the...     »

Nach gemeinsamer bakterieller Expression und Reinigung wurde ein funktionell aktiver und Trichostatin-A (TSA)-sensitiver heterotrimerer Hda1 Komplex erhalten. Eine Charakterisierung der Interaktion des HDAC Komplexes mit sowohl einzelsträngiger als auch doppelsträngiger DNA identifizierte die N-terminalen Hälften von scHda2p und scHda3p als Bindemoleküle. Durch Röntgenstrahlkristallographie wurde eine hochauflösende Struktur der scHda3p DNA-Bindedomain (DBD3) aufgeklärt. In der hier beschriebenen Studie wurde die Kristallstruktur von Sap5 im Komplex mit Pepstatin-A mit einer Auflösung von 2.5Å erfolgreich aufgeklärt. Dies ermöglicht einen Vergleich sowohl der strukturellen Details als auch des Mechanismus der Inhibitorbindung unter den verschiedenen Mitgliedern der Untergruppe Sap4-6.     «

Nach gemeinsamer bakterieller Expression und Reinigung wurde ein funktionell aktiver und Trichostatin-A (TSA)-sensitiver heterotrimerer Hda1 Komplex erhalten. Eine Charakterisierung der Interaktion des HDAC Komplexes mit sowohl einzelsträngiger als auch doppelsträngiger DNA identifizierte die N-terminalen Hälften von scHda2p und scHda3p als Bindemoleküle. Durch Röntgenstrahlkristallographie wurde eine hochauflösende Struktur der scHda3p DNA-Bindedomain (DBD3) aufgeklärt. In der hier beschriebene...     »