Transkriptionsfaktoren der Nuklearfaktor-kappa B (NF-κB)/Rel-Familie spielen eine wichtige Rolle bei entzündlichen und proliferativen Zellreaktionen. Der dimere NF-κB-Komplex wird im Zytosol durch Inhibitor-kappa B (IκB)-Proteine inaktiviert. Zahlreiche Stimuli induzieren eine Aktivierung und nukleäre Translokation von NF-κB, indem sie eine Proteolyse dieser inhibitorischen IκB-Proteine bewirken. Eine Dysregulation des NF-κB-Systems wird sowohl bei entzündlichen als auch malignen Erkrankungen vermutet. Übergeordnetes Ziel der vorliegenden Arbeit war, die Rolle von aktiviertem NF-κB bei Arteriosklerose besser zu verstehen. Zur Identifikation von NF-κB im arteriosklerotisch veränderten Gewebe wurde die indirekte Immunfluoreszenztechnik zusammen mit dem G/R-Filtersystem eingesetzt. Für diese Experimente wurde ein Antikörper verwendet, der selektiv nur die aktivierte Form von NF-κB erkennt. Mit dieser Technik konnte aktiviertes NF-κB zum ersten Mal in situ in arteriosklerotischen Läsionen nachgewiesen werden. Zur Darstellung der unterschiedlichen Zelltypen, in welchen NF-κB aktiviert war, wurden immunhistochemische Verfahren verwendet (Doppelfärbungen). Aktiviertes NF-κB konnte in Monozyten/Makrophagen, glatten Muskelzellen und Endothelzellen gezeigt werden. Bei histologischen Gewebs-präparaten der Aorta und verschiedener anderer Arterien ohne arteriosklerotische Veränderungen sowie einer oberflächlichen Vene zeigte sich bei den Untersuchungen keine oder nur eine minimale NF-κB-Aktivierung. Gelretardierungsassays gaben Aufschluß über die Bindungsaktivität nukleärer Extrakte aus normalen und arteriosklerotischen Läsionen. In diesen Experimenten wurde eine deutlich erhöhte NF-κB-Bindungsaktivität in den nukleären Extrakten aus arteriosklerotisch veränderten Gefäßen, verglichen mit gesundem Gewebe, festgestellt. Mit Doppelfärbungen wurde eine Kolokalisation von NF-κB und den NF-κB/Rel-gesteuerten Zielgenen TF (”tissue factor”) und ICAM-1 (”intercellular adhesion molecule-1”) dargestellt. Eine Aktivierung dieses Transkriptionsfaktors, scheint also mit direkten Auswirkungen auf die Genregulation verbunden zu sein.     «

Transkriptionsfaktoren der Nuklearfaktor-kappa B (NF-κB)/Rel-Familie spielen eine wichtige Rolle bei entzündlichen und proliferativen Zellreaktionen. Der dimere NF-κB-Komplex wird im Zytosol durch Inhibitor-kappa B (IκB)-Proteine inaktiviert. Zahlreiche Stimuli induzieren eine Aktivierung und nukleäre Translokation von NF-κB, indem sie eine Proteolyse dieser inhibitorischen IκB-Proteine bewirken. Eine Dysregulation des NF-κB-Systems wird sowohl bei entzündlichen als auch malignen Erkrankungen ve...     »

Nuclear factor-kappa B (NF-kappaB)/Rel transcription factors play an important role in the inducible regulation of a variety of genes involved in the inflammatory and proliferative responses of cells. The present study was designed to elucidate the implication of NF-kappaB/Rel in the pathogenesis of atherosclerosis. Activation of the dimeric NF-kappaB complex is regulated at a posttranslational level and requires the release of the inhibitor protein IkappaB. The newly developed mAb alpha-p65mAb recognizes the IkappaB binding region on the p65 (RelA) DNA binding subunit and therefore selectively reacts with p65 in activated NF-kappaB. By the means of immunofluorescence and immunohistochemical techniques, activated NF-kappaB was detected in the fibrotic-thickened intima/media and athermanous areas of the atherosclerotic lesion. Smooth muscle cells, macrophages, and endothelial cells all showed an activation of NF-kappaB. Little or no activated NF-kappaB was detected in vessels lacking atherosclerosis. Electrophoretic mobility shift assays and co localization of activated NF-kappaB with NF-kappaB target gene expression suggest functional implications for this transcription factor in the atherosclerotic lesion. This study demonstrates the presence of activated NF-kappaB in human atherosclerotic tissue for the first time in situ. Atherosclerosis, characterized by features of chronic inflammation and proliferative processes, may be a paradigm for the involvement of NF-kappaB/Rel in chronic inflammatory disease.     «

Nuclear factor-kappa B (NF-kappaB)/Rel transcription factors play an important role in the inducible regulation of a variety of genes involved in the inflammatory and proliferative responses of cells. The present study was designed to elucidate the implication of NF-kappaB/Rel in the pathogenesis of atherosclerosis. Activation of the dimeric NF-kappaB complex is regulated at a posttranslational level and requires the release of the inhibitor protein IkappaB. The newly developed mAb alpha-p65mAb...     »