Ausgehend von der Beobachtung, dass die kutane Besiedlung mit Staphylococcus aureus von Bedeutung für entzündliche und immunologische Reaktionen beim atopischen Ekzem ist, wurde untersucht, ob von den Bakterien gebildetes Protein A eine Aktivierung der Tumor- Nekrose- Faktor-alpha (TNFα) - Signalkette initiieren und/oder unterhalten kann. Es gelang der Nachweis des in der Keratinozyten- Membran lokalisierten TNFα- R1 Rezeptors. Die anschließenden Versuchreihen wurden an der standardisierbaren HaCaT- Zelllinie durchgeführt; es kamen immunbiochemische Techniken (Western Blot, Immunpräzipitation, RT- PCR, ELISA) und immunhistochemische Verfahren zur Anwendung. Hiermit konnte nachgewiesen werden, dass Protein A an den TNFα- R1 bindet und wichtige Mitglieder der TNFα- Signalkette wie JNK, MEK, p 38, NF-κB und AP-1 aktiviert. Nach Aktivierung dieser Signaltransduktion wird u.a. vermehrt Interleukin- 8 (IL- 8) und Cyclooxygenase-2 (COX-2) produziert; diese für Entzündungsreaktionen wichtigen Mediatoren ließen sich nach Inkubation von HaCaT- Keratinozyten mit Protein A mittels RT- PCR und ELISA nachweisen.      «

Ausgehend von der Beobachtung, dass die kutane Besiedlung mit Staphylococcus aureus von Bedeutung für entzündliche und immunologische Reaktionen beim atopischen Ekzem ist, wurde untersucht, ob von den Bakterien gebildetes Protein A eine Aktivierung der Tumor- Nekrose- Faktor-alpha (TNFα) - Signalkette initiieren und/oder unterhalten kann. Es gelang der Nachweis des in der Keratinozyten- Membran lokalisierten TNFα- R1 Rezeptors. Die anschließenden Versuchreihen wurden an der standardisierbaren Ha...     »

Based on the clinical observation that the colonisation of the skin with staphylococcus aureus is important for inflammatory and immunological reactions with regard to atopic dermatitis it was examined whether bacterial protein A activates the TNFα signal cascade. In fact TNFα- R1 receptor was detected in the membrane of human keratinocytes. The following experiments were performed on standardized HaCaT- cell lines using immunbiochemical techniques (Western Blot , immunprecipitation, RT- PCR, ELISA) and immunhistochemical methods. Hereby it was proven that protein A binds to TNFα- R1 receptor and activates important elements of the TNFα signal cascade such as JNK, MEK, p 38, NF- κB and AP-1. Following the activation of this signal chain increased concentrations of IL-8 and COX2 are produced; these important mediators of inflammatory reactions were detected after incubation of HaCaT keratinocytes with protein A using RT- PCR and ELISA.      «

Based on the clinical observation that the colonisation of the skin with staphylococcus aureus is important for inflammatory and immunological reactions with regard to atopic dermatitis it was examined whether bacterial protein A activates the TNFα signal cascade. In fact TNFα- R1 receptor was detected in the membrane of human keratinocytes. The following experiments were performed on standardized HaCaT- cell lines using immunbiochemical techniques (Western Blot , immunprecipitation, RT- PCR, EL...     »