In der vorliegenden Arbeit wird die Wirkung des CDK Inhibitors Bay 1000394 auf primäre CLL Zellen untersucht. Im Speziellen die Auswirkungen auf die Aktivierung von programmiertem Zelltod (Apoptose). Die eingesetzten Techniken beinhalten durchflusszytometrische Analysen (Annexin-V-Assay, DiOC6-Staining, ΔΨm, Tunel-Assay) und Immunoblot Techniken. Neben proliferativ inaktiven (G0/G1) primären CLL Zellen wird auch ein in vitro Stimulationsmodell für proliferierende CLL Zellen und Interaktionen von CLL Zellen mit dem Mikromilieu durch den Einsatz von supportivem Stroma analysiert. Die Ergebnisse zeigen, dass durch Inhibition der CDK Aktivität bereits im nanomolaren Bereich hocheffektiv programmierter Zelltod in CLL-Zellen ausgelöst wird, nicht nur durch klassische Apoptose, sondern auch durch Caspase-unabhängige Mechanismen jenseits von Nekroptose.      «

In der vorliegenden Arbeit wird die Wirkung des CDK Inhibitors Bay 1000394 auf primäre CLL Zellen untersucht. Im Speziellen die Auswirkungen auf die Aktivierung von programmiertem Zelltod (Apoptose). Die eingesetzten Techniken beinhalten durchflusszytometrische Analysen (Annexin-V-Assay, DiOC6-Staining, ΔΨm, Tunel-Assay) und Immunoblot Techniken. Neben proliferativ inaktiven (G0/G1) primären CLL Zellen wird auch ein in vitro Stimulationsmodell für proliferierende CLL Zellen und Interaktionen vo...     »

This work elucidates the effects of Bay 1000394, a CDK-Inhibitor, on primary CLL cells utilizing flow cytometry assays (Annexin-V-Assay, DiOC6-Staining ΔΨm, Tunel-Assay), and immunoblotting techniques. We analyze the effects of Bay 1000394 on resting CLL cells and on proliferating CLL cells stimulated with IL-2 and CpG oligonucleotides in an in vitro stimulation model. Additionally, we analyze the impact of interactions of CLL cells in the presence of supportive stroma on the effects of programmed cell death mediation for Bay 1000394. The results show that nanomolar concentrations of Bay 1000394 are highly effective in inducing apoptosis within a large proportion of resting, proliferating and stromal supported CLL cells. Interestingly we also detect caspase independent forms of programmed cell death different from necroptosis.     «

This work elucidates the effects of Bay 1000394, a CDK-Inhibitor, on primary CLL cells utilizing flow cytometry assays (Annexin-V-Assay, DiOC6-Staining ΔΨm, Tunel-Assay), and immunoblotting techniques. We analyze the effects of Bay 1000394 on resting CLL cells and on proliferating CLL cells stimulated with IL-2 and CpG oligonucleotides in an in vitro stimulation model. Additionally, we analyze the impact of interactions of CLL cells in the presence of supportive stroma on the effects of programm...     »