In this work, a redox-neutral, cell free enzymatic cascade was developed for the production of L‑alanine from commonly available D-glucose. Therefor, a variety of enzymes has been cloned, expressed and characterized under the desired cascade conditions. Optimization of the biocatalysts was done via directed evolution and rational protein design. Molecular dynamics analysis for the engineered aldehyde dehydrogenase from Thermoplasma acidophilum gave insights into improved kinetic parameters. Finally a fine tuning of the cascade parameters such as enzyme ratio and buffer concentration could further increase the economy of the designed process.     «

In this work, a redox-neutral, cell free enzymatic cascade was developed for the production of L‑alanine from commonly available D-glucose. Therefor, a variety of enzymes has been cloned, expressed and characterized under the desired cascade conditions. Optimization of the biocatalysts was done via directed evolution and rational protein design. Molecular dynamics analysis for the engineered aldehyde dehydrogenase from Thermoplasma acidophilum gave insights into improved kinetic parameters. Fina...     »

In dieser Arbeit wurde eine redox-neutrale, zellfreie Enzymkaskade zur Produktion von L-Alanin aus D‑Glucose entwickelt. Dazu wurde eine Auswahl an Enzymen kloniert, exprimiert und unter den gewünschten Kaskadenbedingungen charakterisiert. Die Optimierung der Biokatalysatoren erfolgte durch “directed evolution” und “rational protein design”. Eine „molecular dynamics“ Analyse der modifizierten Aldehyd Dehydrogenase von Thermoplasma acidophilum gab Einblicke in die verbesserten kinetischen Eigenschaften. Letztendlich konnte durch ein Feintuning der Kaskadenparameter (wie z.B. dem Enzymverhältnis oder der Pufferkonzentration) die Wirtschaftlichkeit der entwickelten Kaskade weiter erhöht werden.     «

In dieser Arbeit wurde eine redox-neutrale, zellfreie Enzymkaskade zur Produktion von L-Alanin aus D‑Glucose entwickelt. Dazu wurde eine Auswahl an Enzymen kloniert, exprimiert und unter den gewünschten Kaskadenbedingungen charakterisiert. Die Optimierung der Biokatalysatoren erfolgte durch “directed evolution” und “rational protein design”. Eine „molecular dynamics“ Analyse der modifizierten Aldehyd Dehydrogenase von Thermoplasma acidophilum gab Einblicke in die verbesserten kinetischen Eigensc...     »